Kluczowa różnica między wektorami insercyjnymi i zastępczymi polega na tym, że wektor insercyjny ma zdolność do insercji umiarkowanej długości obcego DNA, podczas gdy wektor zastępczy ma zdolność przystosowania się do większych długości obcego DNA.
Wektory fagowe to bakteriofagi używane do klonowania. Istnieją dwa typy wektorów fagowych; są to wektor wstawiania i wektor zastępczy. Ponadto wszystkie wektory fagowe składają się z nieistotnych genów. Jednak te geny muszą zostać usunięte z fagów, aby ułatwić nowe wstawki obcego DNA.
Co to jest wektor wstawiania?
Po pierwsze, wektor wstawiania jest najprostszą formą wektorów do klonowania lambda. W rzeczywistości jest to typ wektora fagowego, który ma unikalne miejsce restrykcyjne wprowadzone do genomu wektora w pozycji opcjonalnego DNA. Ponadto fagowy DNA pozostaje bez usunięcia. To nieusunięcie fagowego DNA ogranicza wielkość wstawek (obcego DNA), które mają być sklonowane w wektorze. Ponadto wektory te są przydatne w klonowaniu i ekspresji cDNA. GT10, GT11 i Zap to przykłady tego wektora.
Rysunek 01: Fag lambda
Wektor wstawiania składa się z jednego miejsca rozpoznawania. Podstawową funkcją tego wektora jest opracowanie bibliotek cDNA pochodzących z eukariotycznych sekwencji mRNA. Co więcej, może pomieścić tylko obce długości DNA w zakresie od 05-11 kb. Posiada również unikalne miejsce cięcia do wstawiania obcego DNA.
Czym są wektory zastępcze?
Wektor zastępczy lub wektor substytucyjny to rodzaj wektora fagowego, który powstał w wyniku usunięcia środkowego regionu „fragmentu wypełniającego” fagowego DNA. Pożądana wstawka obcego DNA zastępuje DNA faga.
Rysunek 02: Wektor zastępczy
Wektory zastępcze są ważne w tworzeniu bibliotek genomowych, takich jak EMBL4 i Charon40. Wektory te mogą pomieścić większą długość obcego DNA w zakresie od długości 08-24 kb. Region wypełniający składa się również z genu, który sprawia, że wektor fagowy jest nieżywotny wewnątrz gospodarza bakteryjnego.
Jakie są podobieństwa między wektorami wstawiania i zastępowania?
- Wektory insercyjne i zastępcze są wektorami fagowymi.
- Oba wektory mieszczą obce wstawki DNA.
- Oboje są pomocni w tworzeniu bibliotek DNA.
Jaka jest różnica między wektorami wstawiania i zastępowania?
Wektory wstawiania a zastępcze |
|
| Wektor insercyjny to typ wektora fagowego, który ma miejsce restrykcyjne wprowadzone do genomu faga w miejscu opcjonalnego DNA. | Wektor zastępczy jest rodzajem wektora fagowego, który powstał w wyniku usunięcia środkowego regionu „fragmentu wypełniającego” fagowego DNA |
| Rozmiar wstawianych fragmentów | |
| 05-11 kb długość | 08-24 kb długość |
| Fragment wypełniający | |
| Brak fragmentu wypełniacza | Fragment wypełniający zostaje zastąpiony obcą wstawką |
| Funkcja | |
| Ważne tworzenie bibliotek cDNA | Ważne w tworzeniu bibliotek genomowych |
| Przykłady | |
| GT10, GT11 i Zap to przykłady | EMBL4 i Charon40 są przykładami |
| Rozszczepienie strony | |
| Obecna jest unikalna strona dekoltu | Miejsce cięcia zawiera geny, które nie są niezbędne dla cyklu litycznego |
Podsumowanie - wektory wstawiania a zastępcze
Zarówno wektory insercyjne, jak i zastępcze są dwoma typami wektorów fagowych. Oba wektory mają miejsca restrykcyjne, które ułatwiają akomodację nowych obcych wstawek DNA. Wektory insercyjne są ważne w tworzeniu bibliotek cDNA, podczas gdy wektory zastępcze są ważne w tworzeniu bibliotek genomowych. Ponadto wektory insercyjne mieszczą wstawki DNA o umiarkowanej długości. Ale wektory zastępcze mogą pomieścić większe długości obcych wstawek DNA. Ogólnie rzecz biorąc, jest to kluczowa różnica między wektorami wstawiania i zastępowania.
