Kluczowa różnica – TLC vs HPTLC
TLC i HPTLC to dwie techniki chemiczne stosowane do oddzielania nielotnych składników w mieszaninie. Kluczową różnicą między TLC i HPTLC jest to, że materiał chłonny w płytce TLC ma duże cząstki, podczas gdy płytki HPTLC mają bardzo małe cząstki materiału adsorbującego.
TLC to chromatografia cienkowarstwowa. HPTLC to wysokowydajna chromatografia cienkowarstwowa, która jest zaawansowaną techniką w porównaniu z metodą TLC.
Co to jest TLC?
TLC lub chromatografia cienkowarstwowa to podstawowa technika chemiczna stosowana do oddzielania nielotnych składników w mieszaninie. Eksperyment ten przeprowadza się przy użyciu arkuszy szkła, plastiku lub papieru. Arkusz ten jest pokryty cienką warstwą celulozy lub żelu krzemionkowego (materiał adsorbujący). Ta cienka warstwa jest znana jako faza stacjonarna TLC. Arkusz jest znany jako płyta TLC.
Przed eksperymentem linia bazowa i górna są zaznaczone ołówkiem na płytce TLC. Następnie próbkę nanosi się wzdłuż tej linii za pomocą kapilary. Następnie płytkę TLC umieszcza się pionowo w fazie ruchomej. Faza ruchoma to rozpuszczalnik (lub mieszanina rozpuszczalników) umieszczony w pojemniku. Umieszczając płytkę TLC w tej fazie ruchomej, należy utrzymywać linię podstawową nad marginesem rozpuszczalnika. W przeciwnym razie próbka zostanie rozpuszczona w rozpuszczalniku.
Płyta TLC może przez pewien czas pozostawać w fazie ruchomej. Następnie z czasem faza ruchoma unosi się w górę płytki dzięki działaniu kapilarnemu. Jeśli próbka jest rozpuszczalna w fazie ruchomej, unosi się w górę wraz z fazą ruchomą.
Za tą metodą TLC kryje się zasada „podobne rozpuszcza podobne”. Oznacza to, że związki polarne rozpuszczają się w rozpuszczalnikach polarnych, podczas gdy związki niepolarne rozpuszczają się w rozpuszczalnikach niepolarnych. Faza stacjonarna to zazwyczaj żel krzemionkowy lub celuloza, która jest związkiem polarnym. Stosowaną fazą ruchomą jest niepolarny rozpuszczalnik, taki jak heksan. Dlatego też, jeśli próbka zawiera jakiekolwiek składniki niepolarne, składniki te będą migrować w górę wraz z fazą ruchomą. Komponenty Polar przykleją się do płytki. Wśród ruchomych komponentów, umiarkowanie niepolarne związki będą migrować powoli, podczas gdy wysoce niepolarne związki będą migrować szybko. Gdy czoło rozpuszczalnika osiągnie górną linię płytki TLC, płytkę wyjmuje się i pozostawia do wyschnięcia.
Rysunek 01: Technika TLC
Jeżeli składniki próbki były związkami barwnymi, na płytce powinny znajdować się kolorowe plamki w różnych miejscach. Ale jeśli komponenty były bezbarwne, należy zastosować inne techniki; na przykład rozpylanie ninhydryny w celu wykrycia amoniaku lub amin (amin pierwszorzędowych i amin drugorzędowych).
Co to jest HPTLC?
HPTLC lub wysokowydajna chromatografia cienkowarstwowa to zaawansowana forma chromatografii cienkowarstwowej (TLC). Rozdzielczość i dokładność HPTLC są bardzo wysokie. Większość kroków tej techniki można zautomatyzować.
Płytki używane w HPTLC zawierają cząstki żelu krzemionkowego o bardzo małych rozmiarach, a gęstość upakowania żelu na płytce jest wysoka. Powierzchnia płyty jest gładka i zapewnia skuteczną separację. Analiza jest szybsza niż technika TLC. Czułość tej metody jest również wysoka. W HPTLC kilka różnych próbek można rozdzielić na tej samej płytce bez żadnego etapu przygotowania próbki.
Jaka jest różnica między TLC a HPTLC?
TLC a HPTLC |
|
| TLC to chromatografia cienkowarstwowa. | HPTLC to wysokowydajna chromatografia cienkowarstwowa. |
| Technika | |
| Jest to podstawowa technika chemiczna stosowana do oddzielania nielotnych składników w mieszaninie. | Jest to zaawansowana forma chromatografii cienkowarstwowej (TLC). |
| Płyta | |
| Płyta TLC może być wykonana z papieru, plastiku lub szkła, na które nakładany jest materiał pochłaniający o dużych cząstkach. | Płytki HPTLC zawierają bardzo małe cząstki materiału adsorbującego. |
| Rozdzielczość | |
| Metoda TLC daje słabą rozdzielczość, gdy próbka zawiera komponenty o podobnych właściwościach. | Metoda HPTLC daje wysoką rozdzielczość. |
| Czas | |
| Technika TLC jest techniką czasochłonną. | HPTLC daje wyniki z większą szybkością niż metoda TLC. |
Podsumowanie – TLC kontra HPTLC
HPTLC to zaawansowana forma TLC. Kluczową różnicą między TLC a HPTLC jest to, że płytka TLC może być wykonana z papieru, plastiku lub szkła, które są nakładane z materiałem adsorbującym mającym duże cząstki, podczas gdy płytki HPTLC mają bardzo małe cząstki materiału adsorbującego.
