Kluczowa różnica – jednowarstwowa a kultura zawiesinowa
Kultura tkankowa to metodologia stosowana do indukowania wzrostu komórek oddzielonych od organizmu i hodowanych na różnych podłożach hodowlanych. W hodowli tkankowej pożywki hodowlane odgrywają ważną rolę. Różne komórki rosną w różnych podłożach hodowlanych w zależności od cech fizjologicznych i chemicznych komórek. Hodowla jednowarstwowa i hodowla zawiesinowa to dwa główne typy kultur stosowanych w procesie hodowli tkankowej. Hodowla jednowarstwowa jest kulturą zależną od zakotwiczenia, w której komórka rośnie, gdy jest przyczepiona do podłoża, a hodowla zawiesinowa jest kulturą niezależną od zakotwiczenia, w której agregaty komórkowe są wykorzystywane do zakładania hodowli komórkowych w pożywce płynnej. Jest to kluczowa różnica między kulturą jednowarstwową a kulturą zawiesinową.
Czym jest kultura jednowarstwowa?
Hodowla jednowarstwowa jest zdefiniowana jako rodzaj hodowli, w której komórki hoduje się w pojedynczej warstwie na kolbie lub szalce Petriego zawierającej pożywkę hodowlaną. Hodowla jednowarstwowa jest również nazywana kulturą przylegającą lub kulturą zależną od zakotwiczenia. Powodem odniesienia się do hodowli przylegającej lub zależnej od zakotwiczenia jest to, że komórki te potrzebują substratu do przyłączenia podczas ich wzrostu. Przywierają do kultury komórkowej zawierającej substrat.
Podłoża używane w pożywce hodowlanej należy naładować przed użyciem. Te naładowane substraty promują interakcje międzykomórkowe. Wyładowacz jonów elektrycznych, dwuwartościowe powłoki kationowe i promieniowanie gamma to źródła, które są wykorzystywane do ładowania tych podłoży. W jednowarstwowej pożywce hodowlanej po zaszczepieniu komórek wzrost jest regulowany za pomocą procesu zwanego hamowaniem kontaktowym. Podczas hamowania kontaktu wzrost komórek zostaje zatrzymany, aby zatrzymać proliferację normalnych komórek, gdy utworzą one monowarstwę przyczepioną do powierzchni.
Rysunek 01: Przylegająca kultura
Komórki, których przyczepność zależą od innych substratów, są określane jako komórki przylegające. Te komórki przylegające często pochodzą z tkanek narządów, takich jak nerki itp. Komórki te są nieruchome i zazwyczaj są przyczepione do tkanki łącznej. Dlatego wszystkie te niezbędne czynniki wzrostu powinny być zapewnione podczas hodowli tych komórek na pożywce hodowlanej. Znaczenie hodowli jednowarstwowej polega na tym, że naśladuje ona pierwotne warunki naturalne, w których komórka może się prawidłowo zadomowić.
Co to jest kultura zawieszenia?
Hodowla w zawiesinie może być zdefiniowana jako rodzaj hodowli, w której namnażanie małych agregatów komórek lub pojedynczych komórek odbywa się w zawiesinie w płynnym podłożu, które jest stale mieszane. Innymi słowy, hodowla zawiesinowa jest również znana jako hodowla komórkowa hodowli zawiesinowej komórek. Hodowla ta pomaga w tworzeniu pojedynczych kultur komórkowych, które można wykorzystać podczas badania komórek roślinnych pod względem ich różnych potencjałów i właściwości. Badanie tego aspektu może być wykorzystane do zrozumienia wzajemnych relacji między komórkami i ich wpływu na organizmy wielokomórkowe.
Podczas początkowego rozwoju rośliny powstaje kalus, który jest masą niezróżnicowanych komórek. Ten poziom wzrostu powoduje przeszkody w identyfikacji zdarzeń komórkowych podczas faz wzrostu i rozwoju rośliny. Hodowlę zawiesinową wprowadzono w celu przezwyciężenia tej sytuacji, ponieważ zapewniła ona doskonałą pożywkę hodowlaną do ustanowienia hodowli pojedynczych komórek z małych agregatów komórkowych uzyskanych z kalusa. Wykorzystano to do badania różnych aspektów morfologicznych i biochemicznych na początkowych etapach rozwoju rośliny.
Rysunek 02: Kultura zawieszenia
W kontekście uzyskania idealnej hodowli komórkowej, typową metodą jest przeniesienie kruchej masy kalusa do mieszanego płynnego podłoża, gdzie masa jest łatwo rozbijana i rozpraszana. Następnie duże kalusy są odsiewane, zachowując małe agregaty komórkowe i pojedyncze komórki. Następnie te komórki są przenoszone do innej pożywki. Aktywnie rosnące komórki uzyskuje się po dwóch do trzech tygodniach.
Jakie są podobieństwa między kulturą jednowarstwową a zawiesinową?
- Zarówno hodowle jednowarstwowe, jak i zawiesinowe to dwa rodzaje kultur komórkowych, które są wykorzystywane do tworzenia komórek
- Zarówno jednowarstwowe, jak i zawiesinowe kultury są hodowane na odpowiednich podłożach hodowlanych.
- W kulturach tkankowych powszechnie stosuje się kultury jednowarstwowe i zawiesinowe.
Jaka jest różnica między kulturą jednowarstwową a zawiesinową?
Monowarstwa a kultura zawieszenia |
|
| Hodowla jednowarstwowa jest kulturą zależną od zakotwiczenia, w której komórki rosną, gdy są przyczepione do podłoża. | Hodowla w zawiesinie jest kulturą niezależną od zakotwiczenia, w której namnażanie małych agregatów komórek lub pojedynczych komórek odbywa się w zawiesinie w płynnym podłożu, które jest mieszane. |
| Wymagania | |
| Hodowla jednowarstwowa wymaga naczynia poddanego działaniu kultury tkankowej z okresowym pasażowaniem. | Hodowlę w zawiesinie można uzyskać w naczyniach nie poddanych działaniu hodowli tkankowej. |
| Ograniczenia rozwoju | |
| Wzrost kultury jednowarstwowej będzie ograniczony przez powierzchnię, która bezpośrednio wpływa na wydajność. | Ograniczenie wzrostu hodowli zawiesinowej odbywa się poprzez stężenie komórek w pożywce. |
| Dysocjacja komórki | |
| Dysocjacja komórek odbywa się mechanicznie lub enzymatycznie w hodowli jednowarstwowej. | Hodowla w zawiesinie nie wymaga pomocy enzymów i środków mechanicznych do dysocjacji komórek. |
| Wizualizacja komórki | |
| Hodowla jednowarstwowa umożliwia łatwą wizualizację komórek. | Trudniej jest zobaczyć komórki w hodowlach zawiesinowych. |
| Funkcja | |
| Kultura jednowarstwowa jest stosowana w cytologii, badaniach i ciągłym zbieraniu produktów. | Kultura zawiesinowa jest używana do masowej produkcji białek, badań naukowych i zbioru seryjnego. |
Podsumowanie – Monowarstwa a kultura zawiesinowa
Kultura jednowarstwowa i hodowla zawiesinowa to dwie główne kultury stosowane w kulturach tkankowych. Hodowla jednowarstwowa jest kulturą zależną od zakotwiczenia. Komórki hoduje się w tej hodowli, gdzie są przyczepione do podłoża obecnego w hodowli. Podłoża są ładowane przed użyciem z udziałem różnych źródeł, takich jak powłoki dwuwartościowe i wyładowania jonów. Hodowle zawiesinowe są kulturami niezależnymi od zakotwiczenia, w których komórki rosną bez pomocy substratu do przyczepienia. Hodowla ta pomaga w tworzeniu pojedynczych kultur komórkowych, które można wykorzystać podczas badania komórek roślinnych pod względem ich różnych potencjałów i właściwości. To jest różnica między kulturą jednowarstwową a kulturą zawiesinową.
