Kluczowa różnica między spektroskopią UV vis a spektroskopią fluorescencyjną polega na tym, że spektroskopia UV-widzialna mierzy absorpcję światła w zakresie UV-widzialnym, podczas gdy spektroskopia fluorescencyjna mierzy światło emitowane przez próbkę w zakresie fluorescencji po zaabsorbowaniu światła przy wysoka energia niż emitowany poziom energii.
Spektroskopia to technika pomiaru absorpcji i emisji światła i innego promieniowania przez materię.
Co to jest spektroskopia UV-Vis?
Spektroskopia światła widzialnego UV to technika analityczna, która wykorzystuje absorpcję lub reflektancję części zakresu UV i całych sąsiednich widzialnych obszarów widma elektromagnetycznego. Ta technika występuje w dwóch rodzajach; są to spektroskopia absorpcyjna i spektroskopia odbiciowa. Wykorzystuje światło w zakresie widzialnym i przyległym.
Ogólnie rzecz biorąc, absorpcja lub odbicie światła widzialnego może bezpośrednio wpływać na postrzegany kolor substancji chemicznych biorących udział w procesie. W tym zakresie widma możemy zaobserwować, że atomy i cząsteczki mogą przechodzić przejścia elektronowe. W tym przypadku spektroskopia absorpcyjna jest komplementarna do spektroskopii fluorescencyjnej, w której fluorescencja zajmuje się przejściami elektronów ze stanu wzbudzonego do stanu podstawowego. Ponadto absorpcja mierzy przejścia ze stanu podstawowego do stanu wzbudzonego.
Rysunek 01: Spektroskopia widzialna UV
Ta technika spektroskopowa jest przydatna do analizy ilościowej różnych próbek, takich jak jony metali przejściowych, silnie sprzężone związki organiczne i makrocząsteczki w układach biologicznych. Generalnie analizę spektroskopową przeprowadza się przy użyciu roztworów, ale możemy również wykorzystać ciała stałe i gazy.
Co to jest spektroskopia fluorescencyjna?
Spektroskopia fluorescencyjna to rodzaj spektroskopii elektromagnetycznej, która jest przydatna do analizy fluorescencji próbki. Technika ta polega na użyciu wiązki światła (np. UV) do wzbudzenia elektronów w cząsteczkach niektórych związków, co może spowodować ich emisję światła. Zazwyczaj ta emisja to światło widzialne, ale niekoniecznie takie samo.
Rysunek 02: Spektroskopia fluorescencyjna
Zazwyczaj cząsteczki mają różne stany, znane jako poziomy energetyczne. Technika ta dotyczy przede wszystkim stanów elektronowych i wibracyjnych. Często próbka analitu zawiera cząsteczki w podstawowym stanie elektronowym i wzbudzonym stanie o wyższej energii. Te dwa stany elektronowe mają między sobą różne stany wibracyjne. Podczas procesu fluorescencji, związki chemiczne są wzbudzane przez pochłanianie fotonów i przechodzą ze stanu podstawowego na wyższy poziom energetyczny. Następnie zderzenia między innymi cząsteczkami powodują, że wzbudzone cząsteczki tracą energię wibracyjną, dopóki nie osiągną niskiego stanu wibracyjnego z tego wzbudzonego stanu. Emituje to fotony o różnych energiach i różnych częstotliwościach. Nazywa się to fluorescencją. Możemy przeanalizować te różne częstotliwości emitowane w ten sposób, aby określić różne poziomy wibracji.
Jaka jest różnica między UV VIS a spektroskopią fluorescencyjną?
Techniki spektroskopowe są przydatne w badaniu właściwości różnych substancji chemicznych. Kluczowa różnica między spektroskopią UV vis i fluorescencyjną polega na tym, że spektroskopia UV-widzialna mierzy absorpcję światła w zakresie UV-widzialnym, podczas gdy spektroskopia fluorescencyjna mierzy światło emitowane przez próbkę w zakresie fluorescencji po zaabsorbowaniu światła o wysokiej energii niż emitowane poziom energii. Co więcej, spektroskopia fluorescencyjna jest bardziej czuła niż spektroskopia UV-widzialna.
Poniższa infografika przedstawia różnice między spektroskopią UV vis a spektroskopią fluorescencyjną w formie tabelarycznej do bezpośredniego porównania.
Podsumowanie – UV Vis a spektroskopia fluorescencyjna
Spektroskopia to ważna technika analityczna. Istnieją różne rodzaje spektroskopii, takie jak spektroskopia IR, spektroskopia UV widzialna, spektroskopia fluorescencyjna itp. Kluczową różnicą między spektroskopią UV vis a spektroskopią fluorescencyjną jest to, że spektroskopia UV-widzialna mierzy absorpcję światła w zakresie UV-widzialnym, podczas gdy fluorescencja spektroskopia mierzy światło emitowane przez próbkę w zakresie fluorescencji po zaabsorbowaniu światła o energii wyższej niż emitowany poziom energii.
