Kluczowa różnica między mikroskopią fluorescencyjną a mikroskopią konfokalną polega na tym, że w mikroskopii fluorescencyjnej cała próbka jest równomiernie zalana światłem ze źródła światła, podczas gdy w mikroskopii konfokalnej tylko niektóre punkty próbki są wystawione na działanie światła źródło światła.
Mikroskopia fluorescencyjna jest ważną techniką analityczną przydatną w badaniu właściwości substancji organicznych i nieorganicznych. Mikroskopia konfokalna jest techniką analityczną przydatną w zwiększaniu rozdzielczości optycznej i kontrastu mikrofotografii za pomocą przestrzennego otworka do blokowania nieostrego światła podczas tworzenia obrazu.
Co to jest mikroskopia fluorescencyjna?
Mikroskopia fluorescencyjna jest ważną techniką analityczną przydatną w badaniu właściwości substancji organicznych i nieorganicznych. Instrumentem, którego używamy do tego pomiaru jest mikroskop fluorescencyjny. Jest to rodzaj mikroskopu optycznego. Ten typ mikroskopu optycznego wykorzystuje fluorescencję zamiast rozpraszania, odbicia, tłumienia i absorpcji lub dodatkowo do nich.
Mikroskop fluorescencyjny wykorzystuje fluorescencję do generowania obrazu. Może to być prosta konfiguracja, taka jak mikroskop epifluorescencyjny, lub bardziej skomplikowana konstrukcja, w tym mikroskop konfokalny, który wykorzystuje przekrój optyczny. Pomaga to uzyskać lepszą rozdzielczość obrazu fluorescencyjnego.
Rysunek 01: Mikroskop fluorescencyjny
Rozważając zasadę mikroskopii fluorescencyjnej, powinniśmy używać próbki do naświetlania światłem o określonej długości fali. Tam próbka pochłania światło przez fluorofory, co powoduje, że emitują one światło o większej długości fali. Ważne jest, aby oddzielić oświetlane światło od znacznie słabszej emitowanej fluorescencji poprzez zastosowanie filtra emisji spektralnej.
Zazwyczaj mikroskop fluorescencyjny zawiera źródło światła, filtr wzbudzenia, lustro dichroiczne i filtr emisyjny. Źródłem światła może być ksenonowa lampa łukowa, lampa rtęciowa, diody LED i lasery. Lustro dichroiczne jest również znane jako dichroiczny rozdzielacz wiązki.
Co to jest mikroskopia konfokalna?
Mikroskopia konfokalna to technika analityczna przydatna do zwiększania rozdzielczości optycznej i kontrastu mikrofotografii przy użyciu przestrzennego otworka do blokowania nieostrego światła podczas tworzenia obrazu. Jest również znany jako konfokalna laserowa mikroskopia skaningowa lub laserowa konfokalna mikroskopia skaningowa. Jest to technika obrazowania optycznego.
W tej mikroskopowej technice przechwytywanie wielu obrazów 2D na różnych głębokościach w próbce umożliwia rekonstrukcję struktur 3D w obiekcie. Technika mikroskopii konfokalnej jest bardzo przydatna w społecznościach naukowych i przemysłowych. Jest zwykle używany w naukach przyrodniczych, kontroli półprzewodników i materiałoznawstwie.
Rysunek 02: Zasada czujnika punktu konfokalnego z patentu Minsky'ego
Podczas tego procesu światło wędruje przez próbkę pod konwencjonalnym mikroskopem tak głęboko, jak może przeniknąć, podczas gdy mikroskop konfokalny, który skupia tylko mniejszą wiązkę światła, przechodzi jednorazowo przez wąski poziom głębokości. Ta technika została opracowana przez Marvina Minsky'ego w 1957 roku.
Jaka jest różnica między mikroskopią fluorescencyjną a mikroskopią konfokalną?
Mikroskopia fluorescencyjna jest ważną techniką analityczną przydatną w badaniu właściwości substancji organicznych i nieorganicznych. Mikroskopia konfokalna jest techniką analityczną przydatną w zwiększaniu rozdzielczości optycznej i kontrastu mikrofotografii za pomocą przestrzennego otworka do blokowania nieostrego światła podczas tworzenia obrazu. Kluczowa różnica między mikroskopią fluorescencyjną a mikroskopią konfokalną polega na tym, że w mikroskopii fluorescencyjnej cała próbka jest równomiernie zalana światłem ze źródła światła, podczas gdy w mikroskopii konfokalnej tylko niektóre punkty próbki są wystawione na działanie światła ze źródła światła.
Poniższa infografika przedstawia różnice między mikroskopią fluorescencyjną a mikroskopią konfokalną w formie tabelarycznej do bezpośredniego porównania.
Podsumowanie – Mikroskopia fluorescencyjna a mikroskopia konfokalna
Mikroskopia fluorescencyjna i mikroskopia konfokalna to dwie techniki analityczne związane z obrazowaniem optycznym. Kluczowa różnica między mikroskopią fluorescencyjną a mikroskopią konfokalną polega na tym, że w mikroskopii fluorescencyjnej cała próbka jest równomiernie zalana światłem ze źródła światła, podczas gdy w mikroskopii konfokalnej tylko niektóre punkty próbki są wystawione na działanie światła ze źródła światła.