Kluczowa różnica między absorbancją a fluorescencją polega na tym, że możemy użyć techniki analizy absorbancji do bezpośredniego pomiaru ilości określonej długości fali, która jest absorbowana przez próbkę bez rozcieńczenia lub przygotowania testu, podczas gdy analiza fluorescencyjna wymaga przygotowania próbki, w której badana próbka musi być związana z odczynnikami fluorescencyjnymi w zestawie testowym.
Absorbancja i fluorescencja to ważne techniki analityczne, które możemy wykorzystać do wykrycia różnych właściwości w danej próbce.
Co to jest absorbancja?
Absorbancja jest miarą zdolności substancji do pochłaniania światła o określonej długości fali. W szczególności jest równy logarytmowi odwrotności transmitancji. W przeciwieństwie do gęstości optycznej absorbancja mierzy ilość światła zaabsorbowanego przez substancję.
Co więcej, spektroskopia mierzy absorbancję (za pomocą kolorymetru lub spektrofotometru). Absorbancja jest właściwością bezwymiarową, w przeciwieństwie do większości innych właściwości fizycznych. Absorbancję można wyjaśnić na dwa sposoby: jako światło zaabsorbowane przez próbkę lub jako światło przepuszczane przez próbkę. Równanie do obliczania absorbancji jest następujące:
A=log10(I0/I)
Gdzie A jest absorbancją, I0 jest promieniowaniem przepuszczanym przez próbkę, a I jest promieniowaniem padającym. Poniższe równanie jest również podobne do powyższego równania pod względem transmitancji (T).
A=-log10T
Co to jest fluorescencja?
Fluorescencja to emisja światła przez substancję, która wcześniej pochłonęła energię. Takie substancje muszą absorbować światło lub jakiekolwiek inne promieniowanie elektromagnetyczne, aby emitować światło jako fluorescencję. Co więcej, to emitowane światło jest rodzajem luminescencji, co oznacza, że emituje się spontanicznie. Emitowane światło często ma dłuższą długość fali niż światło pochłaniane. Oznacza to, że emitowana energia świetlna jest niższa niż energia pochłonięta.
Podczas procesu fluorescencji światło jest emitowane w wyniku wzbudzenia atomów substancji. Pochłonięta energia jest często uwalniana jako luminescencja w bardzo krótkim czasie, około 10-8 sekund. Oznacza to, że możemy zaobserwować fluorescencję, gdy tylko usuniemy źródło promieniowania, które powoduje wzbudzenie.
Istnieje wiele zastosowań fluorescencji w różnych dziedzinach, takich jak mineralogia, gemmologia, medycyna, czujniki chemiczne, badania biochemiczne, barwniki, detektory biologiczne, produkcja lamp fluorescencyjnych itp. Co więcej, możemy uznać ten proces również za proces naturalny; na przykład w niektórych minerałach.
Jaka jest różnica między absorbancją a fluorescencją?
Absorbancja i fluorescencja to ważne techniki analityczne, które możemy wykorzystać do wykrycia różnych właściwości danej próbki. Kluczową różnicą między absorbancją a fluorescencją jest to, że możemy użyć techniki analizy absorbancji do bezpośredniego pomiaru ilości określonej długości fali, która jest absorbowana przez próbkę bez rozcieńczania lub przygotowania testu, podczas gdy analiza fluorescencyjna wymaga przygotowania próbki, w której należy związane z odczynnikami fluorescencyjnymi w zestawie testowym. Ponadto technika fluorescencyjna jest bardziej skuteczna niż absorbancja, ponieważ test fluorescencji jest wysoce specyficzny dla analitu docelowego.
Poniższa infografika przedstawia różnice między absorbancją a fluorescencją w formie tabelarycznej do porównania obok siebie
Podsumowanie – Absorbancja a fluorescencja
Absorbancja jest miarą zdolności substancji do pochłaniania światła o określonej długości fali. Fluorescencja to emisja światła z substancji, która wcześniej pochłonęła energię. Kluczową różnicą między absorbancją a fluorescencją jest to, że możemy użyć techniki analizy absorbancji do bezpośredniego pomiaru ilości określonej długości fali, która jest absorbowana przez próbkę bez rozcieńczania lub przygotowania testu, podczas gdy analiza fluorescencyjna wymaga przygotowania próbki, w której należy związane z odczynnikami fluorescencyjnymi w zestawie testowym.
