Kluczowa różnica między absorbancją a stężeniem krzywej kalibracji polega na tym, że krzywa kalibracji jest wykresem absorbancji i stężenia, absorbancja to ilość światła zaabsorbowanego przez próbkę, natomiast stężenie to ilość substancji rozprowadzonej w jednostce objętości.
Spektroskopia to technika analityczna, która jest przydatna do określania stężenia nieznanego związku obecnego w danej próbce. Dlatego jest to analiza ilościowa. W tej technice możemy określić stężenie związku za pomocą krzywej. Powinniśmy narysować tę krzywą między absorbancją a stężeniem. I możemy narysować wykres dla kilku wartości absorbancji uzyskanych dla różnych znanych wartości stężeń. Następnie możemy wykorzystać wartość absorbancji dla nieznanej próbki do określenia stężenia tej próbki za pomocą wykresu.
Co to jest krzywa kalibracji?
Krzywa kalibracyjna to standardowy wykres, który pokazuje zmianę odpowiedzi instrumentu analitycznego na różne stężenia analitu. Analit to substancja, w której musimy znaleźć stężenie. Aby narysować krzywą kalibracyjną, powinniśmy użyć znanych stężeń substancji obecnej w naszej próbce, aby uzyskać zestaw odpowiedzi lub sygnałów. W przypadku technik spektroskopowych odpowiedziami lub sygnałami są wartości absorbancji. Następnie możemy narysować wykres pomiędzy absorbancją a stężeniem.
Rysunek 01: Struktura krzywej kalibracji
Powinniśmy narysować wykres używając wartości absorbancji uzyskanych dla każdego znanego stężenia. Możemy wykorzystać ten wykres do określenia nieznanego stężenia tego samego związku w danej próbce poprzez pomiar absorbancji tej próbki. Wartość harmonijności w punkcie tej wartości absorbancji na krzywej jest stężeniem związku w próbce.
Co to jest absorbancja?
Absorbancja to odpowiedź spektrofotometru na stężenie próbki. Mierzy ilość światła pochłanianego przez próbkę. Wartość ta zależy od ilości i charakteru związku obecnego w próbce. Możemy podać tę wartość za pomocą następującego równania;
A=log(I/I0)
Gdzie A jest absorbancją, I jest natężeniem wiązki padającej, a Io jest natężeniem wiązki przechodzącej przez próbkę. Możemy podać tę zależność w inny sposób w następujący sposób:
A=– logT
Gdzie T jest transmitancją. Dlatego absorbancja jest związana z transmitancją. dla tej samej substancji, jeśli koncentracja jest wysoka, absorbancja jest również wysoka i odwrotnie. Dzieje się tak dlatego, że jeśli stężenie jest wysokie, próbka zawiera dużą ilość związku, który pochłania światło z wiązki światła. Ponadto mierząc absorbancję spektrofotometrem nie powinniśmy stosować bardzo wysokich lub bardzo niskich stężeń. Dzieje się tak dlatego, że jeśli użyjemy bardzo wysokich stężeń, intensywność padającej wiązki światła może nie być wystarczająca do zaabsorbowania całkowitej ilości związku obecnego w próbce. Jeśli użyjemy niskiego stężenia, czułość urządzenia może nie być wystarczająca do wykrycia małej ilości związku w próbce.
Co to jest koncentracja?
Stężenie to ilość substancji, która rozprowadza się w jednostce objętości próbki. Możemy to zmierzyć w jednostce mol/L, w której podajemy ilość substancji jako wartość molową i objętość próbki w litrach. Nazywamy to stężeniem molowym. Jest to najczęściej stosowana jednostka pomiaru stężenia.
Oprócz tego możemy określić koncentrację jako stężenie masowe, stężenie liczbowe lub stężenie objętościowe.
Jaka jest zależność między absorbancją krzywej kalibracji a stężeniem?
Wykreślamy krzywą kalibracji z dwóch zestawów danych: wartości absorbancji i stężeń. Powinniśmy przyjąć absorbancję jako oś y, a stężenie jako oś x, ponieważ możemy zmienić wartość stężenia. Jest to więc zmienna niezależna. Ale absorbancja zmienia się w zależności od wartości stężenia. Dlatego jest to zmienna zależna. Następnie, jeśli mierzymy absorbancję próbki, możemy uzyskać stężenie tej próbki za pomocą tej krzywej kalibracyjnej.
Jaka jest różnica między absorbancją a stężeniem krzywej kalibracji?
Krzywa kalibracyjna to standardowy wykres, który pokazuje zmianę odpowiedzi instrumentu analitycznego na różne stężenia analitu. Wskazuje absorbancję na osi y i stężenie na osi x. Absorbancja to odpowiedź spektrofotometru na stężenie próbki. Nie ma jednostek. Stężenie to ilość substancji, która rozprowadza się w jednostce objętości próbki. Jego jednostką jest mol/L.
Podsumowanie – Krzywa kalibracji Absorbancja vs Stężenie
Krzywe kalibracyjne, absorbancja i stężenie to terminy szeroko stosowane w spektroskopii. Różnica pomiędzy absorbancją a stężeniem krzywej kalibracji polega na tym, że krzywa kalibracji jest wykresem absorbancji i stężenia, a absorbancja to ilość światła zaabsorbowanego przez próbkę, natomiast stężenie to ilość substancji rozprowadzonej w jednostce objętości.
