Kluczowa różnica między testem radioimmunologicznym a testem immunoradiometrycznym polega na tym, że w teście radioimmunologicznym próbka lub związek do pomiaru jest łączony z radioaktywnym antygenem przed połączeniem, podczas gdy w teście immunoradiometrycznym próbka lub związek natychmiast łączy się z radioznakowanym przeciwciała.
Test immunologiczny to test biochemiczny, który wykrywa obecność lub stężenie makrocząsteczek w roztworze przy użyciu przeciwciała lub antygenu. Do pomiaru antygenów w próbce stosuje się przeciwciała fluorescencyjne i radioaktywne. Początkowo przeciwciała stosowano w technikach precypitacji, takich jak immunoprecypitacja, immunodyfuzja i immunoelektroforeza do analizy białek surowicy. Obecnie do pomiaru leków, markerów nowotworowych i hormonów stosuje się wysoce czułe techniki, takie jak testy radioimmunologiczne i immunoradiometryczne.
Co to jest test radioimmunologiczny?
Radioimmunoassay (RIA) to test immunologiczny wykorzystujący elementy radioaktywne do stopniowego tworzenia kompleksów antygen-przeciwciało. RIA zwykle używa radioaktywnych przeciwciał do wykrycia ilości antygenu w próbce. RIA jest bardzo specyficznym i bardzo czułym testem in vitro. Zasadą OSR jest konkurencyjność. Tutaj radioaktywny antygen konkuruje z nieradioaktywnym antygenem o stałą ilość miejsc wiązania przeciwciała lub receptora. OSR wymaga specjalnych licencji i środków ostrożności, ponieważ stosowane są substancje radioaktywne i pozostaje jedną z najtańszych technik.
Rysunek 01: Test immunologiczny
Podczas RIA znana ilość antygenu staje się często radioaktywna przez znakowanie jej gamma-radioaktywnymi izotopami jodu przyłączonymi do tyrozyny. Następnie ten antygen łączy się ze znaną ilością przeciwciała. Tutaj zarówno antygen, jak i przeciwciało specyficznie wiążą się ze sobą. Następnie dodawana jest próbka surowicy krwi, aby zainicjować konkurencyjną reakcję pomiędzy wyznakowanymi i nieznakowanymi antygenami w surowicy ze specyficznymi przeciwciałami. W tej reakcji przeciwciała uwalniają pewną ilość znakowanego antygenu. Ta ilość jest proporcjonalna do stosunku antygenu znakowanego do niewyznakowanego. Na koniec generowana jest krzywa wiązania w celu określenia ilości antygenu w surowicy krwi pacjenta.
Co to jest test immunoradiometryczny?
Analiza immunoradiometryczna (IRMA) to test immunologiczny wykorzystujący przeciwciała znakowane radioaktywnie. W IRMA przeciwciała są znakowane radioizotopami. Te przeciwciała wiążą się z antygenami obecnymi w określonej próbce. W próbce pozytywnej przeciwciała znakowane radioaktywnie wiążą się z wolnymi epitopami antygenów. Tworzy to kompleks antygen-przeciwciało.
Podczas drugiej reakcji, niezwiązane znakowane przeciwciała są usuwane przy użyciu antygenu fazy stałej. Pozostała liczba radioaktywnych przeciwciał w roztworze jest bezpośrednią funkcją stężenia antygenu. IRMA jest znana jako test nadmiaru odczynnika, w którym jako odczynnik stosuje się nadmiar znakowanego radioaktywnie przeciwciała. Tutaj może reagować nadmierne stężenie znakowanego przeciwciała lub antygenu. W końcowym etapie oddziela się przeciwciała związane z antygenem i wolne, a frakcję związaną z antygenem poddaje się testom radioaktywnym. Tutaj aktywność frakcji jest wprost proporcjonalna do stężenia antygenu.
Jakie są podobieństwa między testem radioimmunologicznym a testem immunoradiometrycznym?
- Zarówno test radioimmunologiczny, jak i immunoradiometryczny to testy immunologiczne wykorzystujące pierwiastki promieniotwórcze do stopniowego tworzenia kompleksów antygen-przeciwciało.
- Tworzą kompleks antygen-przeciwciało.
Jaka jest różnica między testem radioimmunologicznym a testem immunoradiometrycznym?
Radioimmunotest to test immunologiczny, który określa poziom przeciwciał za pomocą antygenu znakowanego radioizotopem, podczas gdy test immunoradiometryczny to test nadmiaru odczynnika, który wykorzystuje nadmierne stężenie znakowanego radioizotopem przeciwciała. Jest to zatem kluczowa różnica między testem radioimmunologicznym a testem immunoradiometrycznym. IRMA jest w stanie zapewnić wyższą czułość niż RIA. W RIA antygeny znakowane są gamma-radioaktywnymi izotopami jodu, natomiast w przeciwciałach IRMA znakowane są izotopami jodu. Jest to więc również różnica między testem radioimmunologicznym a testem immunoradiometrycznym. Ponieważ IRMA jest techniką wykorzystującą nadmiar odczynników, test jest wykonywany w krótszym czasie niż RIA.
Poniższa tabela podsumowuje różnice między testem radioimmunologicznym a testem immunoradiometrycznym.
Podsumowanie – Test radioimmunologiczny kontra test immunoradiometryczny
Radioimmunoassay to test immunologiczny wykorzystujący elementy radioaktywne w stopniowym formowaniu w celu określenia poziomu przeciwciał. RIA zwykle wykorzystuje radioaktywne przeciwciała. Radioaktywny antygen konkuruje z nieradioaktywnym antygenem o stałą ilość miejsc wiązania przeciwciała lub receptora. Test immunoradiometryczny jest testem immunologicznym przeprowadzanym w celu określenia poziomów antygenu w próbce przy użyciu przeciwciał znakowanych radioaktywnie. Te przeciwciała wiążą się z antygenami obecnymi w określonej próbce. Pod koniec każdego testu tworzony jest kompleks antygen-przeciwciało. W celu uzyskania wyników testów rysuje się krzywą wiązania. W teście radioimmunologicznym ilość znakowanego antygenu jest proporcjonalna do stosunku antygenu znakowanego do niewyznakowanego, ale w teście immunoradiometrycznym aktywność frakcji związanej z antygenem jest wprost proporcjonalna do stężenia antygenu. To jest podsumowanie różnicy między testem radioimmunologicznym a testem immunoradiometrycznym.
