Kluczowa różnica między wirowaniem różnicowym a wirowaniem z gradientem gęstości polega na tym, że wirowanie różnicowe oddziela cząstki w mieszaninie w oparciu o rozmiar cząstek, podczas gdy wirowanie z gradientem gęstości oddziela cząstki w mieszaninie w oparciu o gęstość cząstek.
Wirowanie to metoda rozdzielania różnych składników w mieszaninie analitów. Metoda ta polega na obrocie próbki wokół stałej osi, co powoduje wytworzenie siły odśrodkowej. Siła odśrodkowa powoduje, że cząsteczki w próbce przemieszczają się w dół przez płynny ośrodek. Proces ten powoduje sedymentację cząstek lub komórek o różnych rozmiarach i gęstościach w różnym tempie.
Co to jest wirowanie różnicowe?
Wirowanie różnicowe to technika analityczna, w której możemy oddzielić cząstki w mieszaninie w zależności od wielkości cząstki. Jest to najprostsza forma wirowania, zwana także peletkowaniem różnicowym. Ta metoda jest ważna przy oddzielaniu składników w komórce. Cząstki o różnych rozmiarach ulegają sedymentacji w różnym tempie po odwirowaniu. Innymi słowy, duże cząstki osadzają się szybciej niż mniejsze. Co więcej, szybkość sedymentacji można zwiększyć, zwiększając siłę odśrodkową.
Rozważając jego zastosowania, wirowanie różnicowe jest przydatne do zbierania komórek lub wytwarzania surowych frakcji subkomórkowych z homogenatu tkankowego. Np. homogenat wątroby zawiera jądra, mitochondria, lizosomy i pęcherzyki błonowe. Jeśli odwirujemy ten homogenat z małą prędkością i przez krótki czas, możemy uzyskać duże jądra w postaci osadu. Jeśli użyjemy dużej siły odśrodkowej, możemy uzyskać mitochondria w peletce. Jednak próbki biologiczne są zawsze podatne na skażenie.
Co to jest wirowanie z gradientem gęstości?
Wirowanie w gradiencie gęstości to technika analityczna, w której możemy oddzielić cząstki w mieszaninie analitu na podstawie gęstości cząstek. W tej metodzie substancje są zagęszczane w roztworze soli cezu lub w sacharozie. Metoda polega na frakcjonowaniu cząstek na podstawie gęstości wyporu. Gradient gęstości w tej metodzie to sól cezowa lub podłoże z sacharozą. Istnieją dwa rodzaje wirowania w gradiencie gęstości: wirowanie typu rate-zonla i wirowanie izopikniczne.
Wirowanie strefowe szybkości obejmuje środek rozdzielający, który ma strukturę warstwową z wąską strefą na szczycie gradientu gęstości. W tym procesie cząstki mają tendencję do poruszania się z różnymi prędkościami pod wpływem siły odśrodkowej, w zależności od gęstości cząstek. Zwykle wszystkie cząstki wytwarzają peletki, ponieważ gęstość cząstek jest wyższa niż gradient gęstości.
Wirowanie izopykniczne jest drugim rodzajem metody wirowania z gradientem gęstości. Zaczyna się od jednorodnego rozwiązania. Pod wpływem siły odśrodkowej cząstki w mieszaninie analitu poruszają się, aż gęstość cząstek będzie zbliżona do gradientu gęstości. Dlatego możemy nazwać tę technikę również wirowaniem równowagowym.
Jaka jest różnica między wirowaniem różnicowym a wirowaniem z gradientem gęstości?
Wirowanie różnicowe i wirowanie w gradiencie gęstości to dwa rodzaje procesów wirowania związanych z rozdzielaniem składników w mieszaninie analitów. Kluczowa różnica między wirowaniem różnicowym a wirowaniem w gradiencie gęstości polega na tym, że wirowanie różnicowe oddziela cząstki w mieszaninie na podstawie wielkości cząstek, podczas gdy wirowanie z gradientem gęstości oddziela cząstki w mieszaninie na podstawie gęstości cząstek.
Poniższa infografika przedstawia więcej różnic między wirowaniem różnicowym a wirowaniem w gradiencie gęstości.
Podsumowanie - wirowanie różnicowe a wirowanie gradientowe gęstości
Wirowanie różnicowe i wirowanie w gradiencie gęstości to dwa rodzaje procesów wirowania związanych z rozdzielaniem składników w mieszaninie analitów. Kluczowa różnica między wirowaniem różnicowym a wirowaniem w gradiencie gęstości polega na tym, że wirowanie różnicowe oddziela cząstki w mieszaninie na podstawie wielkości cząstek, podczas gdy wirowanie z gradientem gęstości oddziela cząstki w mieszaninie na podstawie gęstości cząstek.
