Kluczowa różnica między elucją izokratyczną a gradientową polega na tym, że elucja izokratyczna odnosi się do utrzymywania stałego stężenia w fazie ruchomej, podczas gdy elucja gradientowa odnosi się do utrzymywania zmiennego stężenia w fazie ruchomej.
Pojęcia izokratyczna i elucja gradientowa są używane w chromatografii. Podczas przebiegu chromatograficznego wykorzystujemy fazę stacjonarną, która jest substancją nieruchomą, wraz z fazą ruchomą, substancją poruszającą się. Elucja izokratyczna i gradientowa opisuje właściwości fazy ruchomej.
Co to jest izokratyczna elucja?
Izokratyczna elucja to termin używany w chromatografii, gdy faza ruchoma ma stałe stężenie. Tutaj stężenie fazy ruchomej jest stałe podczas całego procesu chromatograficznego. W tym procesie możemy obserwować na chromatogramie wzrost szerokości piku wraz z czasem retencji. Prowadzi to jednak do wad – piki późno eluujące dla późnej elucji stają się bardzo płaskie i szerokie. Dlatego te szerokie piki stają się trudne do rozpoznania jako piki.
Co więcej, w elucji izokratycznej selektywność nie zmienia się w zależności od wymiarów kolumny. Oznacza to, że selektywność nie zależy od zmian wymiarów kolumny. Tutaj długość i średnica są uważane za wymiary kolumny. Dlatego piki eluują w tej samej kolejności.
Co to jest elucja gradientowa?
Elucja gradientowa jest terminem używanym w chromatografii, gdy faza ruchoma ma zmienne stężenie. Innymi słowy, koncentracja fazy ruchomej nie musi być stała. Na przykład, w HPLC, powszechna metoda rozdzielania wykorzystuje początkowo 10% metanol, a kończy przy 90%, poprzez stopniowe zwiększanie stężenia. Faza ruchoma ma dwa składniki: słaby rozpuszczalnik i silny rozpuszczalnik. Słaby rozpuszczalnik umożliwia powolną elucję substancji rozpuszczonej, podczas gdy silny rozpuszczalnik powoduje szybką elucję substancji rozpuszczonej. W chromatografii z odwróconymi fazami używamy wody jako słabego rozpuszczalnika i rozpuszczalnika organicznego jako silnego rozpuszczalnika.
Rysunek 01: HPLC
Co więcej, metoda elucji gradientowej zmniejsza późniejsze eluowane składniki, aby przyspieszyć ich elucję, dając wąski pik na chromatogramie. Ta metoda poprawia również kształt i wysokość szczytu. Ponadto w technice elucji gradientowej kolejność elucji zmienia się wraz ze zmianami wymiarów kolumny.
Jaka jest różnica między elucją izokratyczną a gradientową?
Pojęcia izokratyczna i elucja gradientowa są używane w chromatografii. Elucja izokratyczna i gradientowa opisuje właściwości fazy ruchomej. Kluczowa różnica między elucją izokratyczną i gradientową polega na tym, że elucja izokratyczna odnosi się do utrzymywania stałego stężenia w fazie ruchomej, podczas gdy elucja gradientowa odnosi się do utrzymywania zmiennego stężenia w fazie ruchomej.
W izokratycznej technice elucji, szerokość piku wzrasta liniowo wraz z czasem retencji. Jednak w technice elucji gradientowej zatrzymywanie składników później eluujących jest zmniejszone, tak że elucja staje się szybsza i daje wąskie piki. Poza tym w elucji izokratycznej selektywność nie zależy od wymiarów kolumny, ale w elucji gradientowej selektywność zmienia się wraz ze zmieniającymi się wymiarami kolumny.
Poniższa tabela podsumowuje różnicę między elucją izokratyczną a gradientową.
Podsumowanie – elucja izokratyczna a gradientowa
Elucja izokratyczna i elucja gradientowa opisują właściwości fazy ruchomej. Kluczowa różnica między elucją izokratyczną i gradientową polega na tym, że elucja izokratyczna odnosi się do utrzymywania stałego stężenia w fazie ruchomej, podczas gdy elucja gradientowa odnosi się do utrzymywania zmiennego stężenia w fazie ruchomej.
