Kluczowa różnica – DMEM vs EMEM
Hodowla komórek zwierzęcych ma na celu utrzymanie linii komórek zwierzęcych w celu prowadzenia wielu działań badawczych. Linie komórek zwierzęcych są utrzymywane w sterylnych warunkach i wymagają specjalnych technik. Wykorzystywane są w badaniach dotyczących produkcji szczepionek, w celu identyfikacji zachowania komórki wobec czynników rakotwórczych i mutagennych oraz w badaniach nad rakiem. Podłoża do hodowli komórek są bardzo ważne dla powodzenia hodowli komórek zwierzęcych. Istnieją różne rodzaje pożywek do hodowli komórkowych, takie jak pożywka Eagle's Modified Eagle Medium (DMEM) i pożywka Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM). DMEM jest zmodyfikowaną pożywką podstawową o czterokrotnie zwiększonym stężeniu aminokwasów i witamin. Obejmuje to również kilka innych substytucji, które zwiększają warunki odżywcze pożywki. EMEM to jeden z pierwszych rodzajów podłoży do hodowli komórek zwierzęcych opracowanych przez Harry'ego Eagle. Jest to proste, podstawowe podłoże z minimalnymi ilościami składników odżywczych. Kluczową różnicą między dwoma pożywkami jest skład składników odżywczych. EMEM składa się z minimalnych stężeń składników odżywczych wymaganych do wzrostu kultury, podczas gdy DMEM jest bardzo złożonym podłożem o podwyższonych stężeniach aminokwasów i witamin.
Co to jest DMEM?
Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) to zmodyfikowany typ podłoża, który jest dostępny w handlu jako kremowobiały proszek. Jest to zaadaptowane z EMEM, a skład odżywki jest modyfikowany poprzez zwiększenie stężenia aminokwasów i witamin. Stężenie aminokwasów wzrasta nawet dwukrotnie w porównaniu do podłoża podstawowego. Stężenie witamin wzrasta nawet czterokrotnie, zwiększając w ten sposób zawartość składników odżywczych w pożywce.
DMEM jest również modyfikowany poprzez dodanie większej ilości soli, takich jak azotan żelazowy, pirogronian sodu i niektóre nie-niezbędne aminokwasy, takie jak seryna i glicyna. Zmienione jest również stężenie glukozy w pożywce. Oryginalna formulacja składa się z 1000 mg/L glukozy, podczas gdy w DMEM stężenie wzrasta do 4500 mg/L. DMEM wymaga również uzupełnienia podłoża surowicy, ponieważ nie jest to podłoże kompletne. Najczęściej DMEM uzupełnia się płodową surowicą bydlęcą (FBS). FBS dostarcza wymagane białka i czynniki wzrostu do procesu hodowli.
pH podłoża zmienia się po dodaniu wodorowęglanu sodu. pH podłoża przed dodaniem wodorowęglanu sodu wynosi około 6,80 – 7,40, natomiast pH po dodaniu wodorowęglanu sodu waha się w granicach 7,60 – 8,20. Temperatura przechowywania mediów wynosi 2–8 0C.
Rysunek 01: DMEM
Zastosowania DMEM
- Zbadanie zdolności poliomawirusa do tworzenia blaszek w komórkach embrionalnych myszy.
- W badaniach hamowania kontaktu
- W kulturach komórek kurczaka
Co to jest EMEM?
Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) jest jednym z pierwszych opracowanych pożywek do hodowli komórkowych linii komórek zwierzęcych. Pierwsze typy linii komórek zwierzęcych hodowanych przy użyciu EMEM obejmują mysie komórki L i komórki HeLa. Nośnik EMEM jest również rodzajem nośnika zmodyfikowanego. Harry Eagle jako pierwszy sformułował medium EMEM. Podłoża EMEM zawierały niezbędne aminokwasy i witaminy w minimalnym stężeniu wymaganym przez typy komórek. W preparacie nie uwzględniono aminokwasów endogennych, a stężenie glukozy i wodorowęglanu sodu jest zmniejszone. Chociaż pożywka zawierała zrównoważoną ilość minimalnych wymagań wzrostu dla pomyślnego wzrostu komórek.
EMEM nie jest kompletnym medium. Dlatego do pomyślnego wzrostu komórek ssaków niezbędna jest suplementacja surowicą. EMEM jest stosowany na wielu różnych komórkach i nadal jest popularnym nośnikiem wśród badaczy kultur komórkowych.
Jakie są podobieństwa między DMEM i EMEM?
- Oba typy podłoży są używane w hodowli komórek zwierzęcych.
- Oba typy mediów to preparaty płynne.
- Oba typy nośników to nośniki zmodyfikowane z nośnika podstawowego.
- Oba typy podłoży zawierają niezbędne aminokwasy, witaminy i sole nieorganiczne niezbędne do wzrostu.
- Oba typy mediów są niekompletne. Dlatego należy dodać serum.
- Oba typy mediów wykorzystują glukozę jako źródło węgla.
- Oba typy mediów mają wyższe pH i są regulowane przez dodanie wodorowęglanu sodu.
Jaka jest różnica między DMEM a EMEM?
DMEM a EMEM |
|
| DMEM jest zmodyfikowanym typem podłoża podstawowego o zwiększonych stężeniach aminokwasów i witamin. Obejmuje to również kilka innych substytucji, które poprawiają warunki odżywcze pożywki. | EMEM to jeden z pierwszych rodzajów podłoży do hodowli komórek zwierzęcych opracowanych przez Harry'ego Eagle. Jest to proste, podstawowe podłoże z minimalnymi ilościami składników odżywczych. |
| Modyfikacje aminokwasów | |
| Stężenie aminokwasów w pożywce DMEM wzrosło nawet dwukrotnie. | Minimalne stężenie aminokwasów jest stosowane w EMEM. |
| Modyfikacje witamin | |
| Stężenie witamin wzrosło nawet czterokrotnie w DMEM. | Minimalne stężenie witamin jest stosowane w EMEM. |
| Stężenie glukozy | |
| Stężenie glukozy wzrosło do 4500 mg/L w DMEM. | Stężenie glukozy wynosi 1000 mg/L w EMEM. |
| Obecność nieistotnych aminokwasów | |
| Obecny w DMEM. | Nieobecny w EMEM. |
| Obecność dodatkowych komponentów | |
| Składniki takie jak azotan żelazowy, pirogronian sodu są obecne w DMEM. | EMEM zawiera minimalną ilość składników odżywczych. |
Podsumowanie – DMEM vs EMEM
DMEM i EMEM to dwa popularne podłoża do hodowli komórek zwierzęcych, które różnią się głównie składem odżywczym. DMEM to zmodyfikowana forma EMEM, w której stężenie składników odżywczych wzrasta wraz z dodaniem kilku nowych składników. EMEM jest pożywką minimalną i zawiera wszystkie niezbędne czynniki wymagane do pomyślnego wzrostu linii komórek zwierzęcych. Podłoża te powinny być używane w warunkach wysokiej sterylności, a oba podłoża należy uzupełnić surowicą przed użyciem. To jest różnica między DMEM i EMEM.
Pobierz plik PDF DMEM vs EMEM
Możesz pobrać wersję PDF tego artykułu i używać jej do celów offline zgodnie z notatką cytowania. Proszę pobrać wersję PDF tutaj Różnica między DMEM i EMEM
