Kluczowa różnica między izolacją DNA i RNA polega na tym, że izolacja DNA to procedura, w której rodzaj kwasu nukleinowego o nazwie DNA jest ekstrahowany z komórki biologicznej, podczas gdy izolacja RNA jest procedurą, w której rodzaj kwasu nukleinowego o nazwie RNA jest wyekstrahowany z komórki biologicznej.
Izolacja kwasów nukleinowych jest punktem wyjścia w szerokiej gamie dalszych aplikacji. Wysoka jakość kwasów nukleinowych w próbkach wyjściowych jest kluczowym czynnikiem powodzenia kolejnych aplikacji. Izolacja kwasu nukleinowego może być zdefiniowana jako seria etapów w celu uzyskania kwasu nukleinowego w czystej próbce, która może być wykorzystana do różnych dalszych etapów aplikacji. Celem ekstrakcji kwasów nukleinowych jest rozbicie błony komórkowej i osiągnięcie maksymalnej eliminacji lipidów i białek w celu uzyskania czystych kwasów nukleinowych, takich jak DNA lub RNA.
Co to jest izolacja DNA?
Izolacja DNA to rutynowa procedura, w której rodzaj kwasu nukleinowego o nazwie DNA jest ekstrahowany z komórki biologicznej. Izolacja DNA jest wykonywana poprzez ekstrakcję DNA z krwi, próbek zamrożonych tkanek i bloczków parafinowych. Istnieją trzy główne etapy izolacji DNA, w tym liza komórek, ekstrakcja DNA i precypitacja. Podczas lizy komórek komórki w próbce są oddzielane od siebie często za pomocą środków fizycznych, takich jak mielenie lub wirowanie, i umieszczane w roztworze zawierającym sól. Zwykle dodatnio naładowane jony sodu w soli pomagają chronić ujemnie naładowane grupy fosforanowe, które biegną wzdłuż szkieletu DNA. Później dodawany jest detergent w celu rozbicia lipidów w błonie komórkowej i jądrach komórkowych, które uwalniają DNA, gdy te błony ulegają zniszczeniu.
Rysunek 01: Izolacja DNA
DNA jest przeprowadzana w celu uzyskania czystej próbki DNA. Często dodawany jest enzym proteazy w celu degradacji białek związanych z DNA i innych białek komórkowych. Co więcej, część szczątków komórkowych można usunąć przez filtrowanie próbki. Na koniec DNA wytrąca się za pomocą alkoholu. Ponadto, jeśli jest dużo DNA, pod koniec procedury można zaobserwować skąpy biały osad.
Co to jest izolacja RNA?
Izolacja RNA to procedura, w której rodzaj kwasu nukleinowego o nazwie RNA jest ekstrahowany z komórki biologicznej. Procedura ta jest często komplikowana przez obecność enzymów rybonukleazy w komórkach i tkankach, które degradują RNA. W biologii molekularnej do izolacji RNA z próbek stosuje się kilka metod, takich jak ekstrakcja tiocyjanian guanidyny-fenol-chloroform.
Rysunek 02: Izolacja RNA
Izolacja RNA zwykle składa się z kilku etapów, w tym lizy i homogenizacji komórek, wygaszania procesów biochemicznych, partycjonowania kwasów nukleinowych, odzyskiwania RNA, oczyszczania surowego i oceny jakości RNA. Metoda lizy i elucji oparta na bibule filtracyjnej zapewnia wysoką wydajność ekstrakcji RNA. Ponadto ekstrakcja RNA w ciekłym azocie przy użyciu moździerza i tłuczka jest również bardzo przydatną metodą, ponieważ zapobiega aktywności rybonukleazy.
Jakie są podobieństwa między izolacją DNA i RNA?
- Izolacja DNA i RNA to dwa rodzaje procedur izolacji kwasów nukleinowych.
- Obie procedury mają podobne podstawowe etapy, takie jak liza komórek, ekstrakcja i oczyszczanie.
- Te procedury izolują ważne typy kwasów nukleinowych, które mają wiele dalszych zastosowań.
- Przeprowadzane są w warunkach laboratoryjnych.
- Można je wykonać przy użyciu gotowych zestawów.
Jaka jest różnica między izolacją DNA i RNA?
W izolacji DNA, rodzaj kwasu nukleinowego o nazwie DNA jest ekstrahowany z komórki biologicznej, podczas gdy podczas izolacji RNA, rodzaj kwasu nukleinowego o nazwie RNA jest ekstrahowany z komórki biologicznej. Jest to więc kluczowa różnica między izolacją DNA i RNA. Ponadto izolacja DNA jest zwykle przeprowadzana przy pH około 7 do 8, podczas gdy izolacja RNA jest zwykle przeprowadzana przy pH około 4,5.
Poniższa infografika przedstawia różnice między izolacją DNA i RNA w formie tabelarycznej do bezpośredniego porównania.
Podsumowanie – Izolacja DNA kontra RNA
Izolacja DNA i RNA to dwa rodzaje procedur izolacji kwasów nukleinowych. Izolacja DNA to procedura, podczas której DNA jest ekstrahowane z komórki biologicznej. Izolacja RNA to procedura, podczas której RNA jest ekstrahowane z komórki biologicznej. To jest kluczowa różnica między izolacją DNA i RNA.
