Kluczowa różnica między testem białka Bradford i Lowry polega na tym, że test białka Bradforda opiera się na przesunięciu absorbancji barwnika brylantowego błękitu Coomassie G-250, podczas gdy test białka Lowry'ego opiera się na reakcji jonów miedzi (Cu+) wytwarzany przez utlenianie wiązań peptydowych odczynnikiem Folina-Cioc alteu.
Test to technika analityczna, która pomaga scharakteryzować główne składniki funkcjonalne próbki. Dlatego test może być testem jakościowym lub ilościowym. Wiele dziedzin, w tym medycyna laboratoryjna, farmakologia, biologia środowiskowa, biologia molekularna, biochemia i immunologia, rutynowo stosuje tego rodzaju testy. Test białkowy Bradforda i Lowry'ego to dwa testy biochemiczne, które określają stężenie białka w roztworze próbki. Oba testy wykorzystują techniki kolorymetryczne w celu uzyskania wyników.
Co to jest Bradford Protein Assay?
Badford Protein assay to szybka spektroskopowa procedura analityczna do analizy białek. Wykazuje dużą dokładność podczas pomiaru stężenia białka w roztworze. Marion Bradford wprowadził tę procedurę w 1976 roku. W tym teście całkowita reakcja opiera się na składzie aminokwasowym mierzonych białek. Innymi słowy, test białkowy Bradforda jest testem kolorymetrycznym. Wykorzystuje barwnik Coomassie brylantowy niebieski. Stąd ten kolorymetryczny test białkowy zależy od przesunięcia absorbancji barwnika. Brylantowy błękit Coomassie G-250 występuje w trzech formatach: kationowym (czerwonym), anionowym (niebieskim) i neutralnym (zielonym). W warunkach kwaśnych czerwona forma barwnika zamienia się w niebieską. Potwierdza wiązanie białka. Jeśli białko nie jest obecne, roztwór może pozostać w kolorze brązowym.
Rysunek 01: Test białka Bradford
Białkowy test Bradford różni się od innych testów białkowych, ponieważ jest mniej podatny na zakłócenia różnych związków chemicznych obecnych w roztworze białka. Związki te obejmują sód, potas, glukozę i sacharozę itp.
Co to jest test białka Lowry?
Test niskobiałkowy to test biochemiczny używany do określenia całkowitego poziomu białka w roztworze. Oliver H. Lowry jest osobą, która opracowała ten odczynnik w 1940 roku. Procedura przedstawia całkowite stężenie białka w roztworze poprzez zmianę koloru, która jest proporcjonalna do stężenia białka w roztworze. W związku z tym jest to również kolorymetryczny test białek.
Podstawą tej procedury jest reakcja między jonami miedzi (Cu+) wytwarzanymi przez utlenianie wiązań peptydowych a odczynnikiem Folina–Cioc alteu. Odczynnik ten zawiera również kwas fosfomolibdenowy i kwas fosforowo-wolframowy. Jednak mechanizm reakcji testu białka Lowry'ego nie jest dobrze poznany. Ale obejmuje utlenianie reszt cysteiny, tryptofanu i tyrozyny przez redukcję odczynnika Folina-Cioc alteu.
Rysunek 02: Test białka Lowry
Reszty cysteiny przyczyniają się do absorbancji obserwowanej w oznaczeniu białka Lowry'ego, a reakcja daje w wyniku błyszczącą niebieską cząsteczkę; heteropoli niebieski molibden. Redukcję tej cząsteczki mierzy się absorbancją przy 660 nm. Stąd stężenie reszt cysteiny i tryptofanu, które zmniejszyły odczynnik Folina-Cioc alteu, określa całkowite stężenie białka w roztworze.
Jakie są podobieństwa między testem Bradford i Lowry Protein?
- Testy białkowe Bradford i Lowry określają stężenie białka w roztworze.
- Obie metody są metodami kolorymetrycznymi.
- Ponadto czułość obu metod jest wysoka.
Jaka jest różnica między testem Bradforda i Lowry'ego?
Badford i Lowry to dwa rodzaje testów, które określają stężenie białka w roztworze. Test białkowy Bradforda opiera się na przesunięciu absorbancji barwnika brylantowego błękitu Coomassie G-250, podczas gdy test białkowy Lowry'ego opiera się na reakcji jonów miedzi wytwarzanych przez utlenianie wiązań peptydowych z odczynnikiem Folin-Cioc alteu. Jest to więc kluczowa różnica między testem białkowym Bradforda i Lowry'ego. Test białka Bradford zajmuje 15 minut, aby uzyskać wynik, podczas gdy test białka Lowery zajmuje 40-60 minut, aby uzyskać wynik. Jest to zatem kolejna różnica między testem białkowym Bradforda i Lowry'ego. Co więcej, test białkowy Bradforda jest zależny od składu aminokwasowego, podczas gdy test białkowy Lowry'ego jest częściowo zależny od składu aminokwasowego. Stąd jest to również różnica między testem białkowym Bradforda i Lowry'ego.
Poniższa informacja zawiera więcej szczegółów na temat różnicy między testem białkowym Bradforda i Lowry'ego.
Podsumowanie – Bradford vs Lowry Protein Assay
Test to technika analityczna stosowana do scharakteryzowania głównego funkcjonalnego składnika próbki. Test białkowy Bradforda i Lowry'ego to dwa rodzaje testów białkowych, które działają w ramach technik kolorymetrycznych. Zarówno testy białkowe Bradforda, jak i Lowry'ego określają stężenie białka w roztworze. Jednak kluczowa różnica między testem Bradford i Lowry Protein Assay polega na stosowanej przez nie technice kolorymetrycznej. Test białkowy Bradforda wykorzystuje błękit brylantowy Coomassie G-250, podczas gdy test białkowy Lowry'ego wykorzystuje jony miedzi (Cu+) i odczynnik Folina-Cioc alteu. Co więcej, metoda Bradforda daje szybkie wyniki niż test białkowy Lowry'ego. Jednak obie metody są bardzo czułymi metodami i podlegają wpływom różnych substancji.
