Kluczowa różnica między łączeniem chromosomów a malowaniem chromosomów polega na tym, że łączenie chromosomów jest techniką barwienia, która wyświetla regiony chromosomów w rozróżnialnych ciemnych i jasnych pasmach, ale malowanie chromosomów jest techniką hybrydyzacji, w której określone regiony lub segmenty chromosomów są pomalowane za pomocą znakowanych fluorescencyjnie sond specyficznych dla sekwencji.
W cytogenetyce konieczne jest wytworzenie widocznego kariotypu organizmu w celu identyfikacji chromosomów i ich aberracji. Pasmowanie chromosomów i malowanie chromosomów to dwie techniki cytogenetyczne, które pomagają w wizualizacji chromosomów. Obie techniki są przydatne w identyfikacji zaburzeń genetycznych.
Co to są pasma chromosomów?
Wstęgi chromosomów to technika barwienia, która wyświetla naprzemiennie jasne i ciemne prążki lub regiony wzdłuż długości chromosomu. Prążek odnosi się do części chromosomu, która jest wyraźnie odróżnialna od sąsiednich segmentów przez to, że jest ciemniejsza lub jaśniejsza. W celu wytworzenia ciemnych i jasnych prążków konieczne jest wybarwienie chromosomów odpowiednim barwnikiem, takim jak barwnik fluorescencyjny chinakryna lub barwnik Giemsa.
Istnieje kilka rodzajów technik tworzenia pasm chromosomowych. Wśród nich, pasma Q, pasma odwrócone (R) i pasma G są uogólnionymi technikami pasowania. Technika pasmowania G wykorzystuje barwnik zwany barwieniem Giemsy, który barwi bogate w AT regiony heterochromatyczne w ciemno zabarwionych prążkach oraz bogate w GC regiony euchromatyczne w słabo zabarwionych prążkach. Prążki R są odwrotnością prążków G i barwią regiony bogate w GC w ciemnych prążkach i regiony bogate w AT w jasnych prążkach. Z kolei pasmo Q wykorzystuje barwnik fluorescencyjny chinakrynę i barwi chromosomy żółtą fluorescencją o różnej intensywności. Technika prążkowania C to kolejna technika prążkowania, która barwi regiony centromeru. Co więcej, technika T-banding wizualizuje regiony telomerów.
Rysunek 01: Pasma chromosomów
Wzór prążków jest unikalny dla organizmów. Dlatego te unikalne wzory prążków są ważne w identyfikacji chromosomów i wykrywaniu aberracji chromosomowych (pęknięcia chromosomów, utrata, duplikacja, translokacja lub odwrócone segmenty).
Co to jest malowanie chromosomów?
Malowanie chromosomów to technika, w której określone regiony lub segmenty chromosomów są malowane sondami specyficznymi dla sekwencji, które są znakowane fluorescencyjnie. Dlatego malowanie chromosomów jest zawsze połączone z techniką FISH in situ. Jest całkowicie oparty na hybrydyzacji molekularnej z sondami specyficznymi dla sekwencji na chromosomach. Dlatego potrzebuje specyficznych sond w celu hybrydyzacji docelowych chromosomów lub regionów chromosomów.
Rysunek 02: Malowanie chromosomów
Co więcej, ta technika początkowo wymaga denaturacji docelowego chromosomalnego DNA, które znajduje się w metafazie. Po drugie, etap hybrydyzacji odbywa się z sondami. Gdy sondy znajdą swoje sekwencje komplementarne, hybrydyzują z określonymi regionami chromosomu. Zhybrydyzowane miejsca możemy łatwo obserwować za pomocą autoradiografii lub immunofluorescencji. Przygotowanie sond, denaturacja, hybrydyzacja i wizualizacja to cztery główne etapy malowania chromosomów.
Jeśli chodzi o zastosowania, malowanie chromosomów jest przydatne przy identyfikowaniu rearanżacji chromosomów, punktów przerwania oraz przy określaniu materiałów pozachromosomalnych. Co więcej, jest potężnym narzędziem w dokładnej lokalizacji różnych sekwencji genów chromosomów na poziomie mikroskopowym. Ponadto malowanie chromosomów jest pomocne w identyfikacji genów pożądanych cech w chromosomach.
Jakie są podobieństwa między pasmami chromosomów a malowaniem chromosomów?
- Bandowanie chromosomami i malowanie chromosomów to dwie techniki stosowane w analizie cytogenetycznej.
- Obie techniki wizualizują chromosomy zwykle w metafazie.
- Te techniki pozwalają zidentyfikować normalne chromosomy i aberracje.
- Ponadto techniki te są naprawdę przydatne w identyfikacji zaburzeń genetycznych.
Jaka jest różnica między pasmami chromosomów a malowaniem chromosomów?
Wstęgi chromosomów to technika barwienia, która wyświetla części chromosomów w ciemnych i jasnych prążkach, które można rozróżnić. Tymczasem malowanie chromosomów to technika hybrydyzacji polegająca na malowaniu określonych regionów chromosomów za pomocą sond specyficznych dla sekwencji, które są znakowane fluorescencyjnie. Jest to więc kluczowa różnica między pasmowaniem chromosomów a malowaniem chromosomów. Co więcej, prążkowanie chromosomów powoduje powstawanie naprzemiennych ciemnych i jasnych prążków wzdłuż chromosomu, podczas gdy malowanie chromosomów wytwarza fluorescencyjnie oznakowane regiony chromosomów.
Ponadto prążkowanie chromosomów zależy od zdolności chromosomalnego DNA do barwienia barwnikiem, podczas gdy malowanie chromosomów zależy od hybrydyzacji molekularnej z sondami specyficznymi dla sekwencji na chromosomach. Jest to istotna różnica między opasaniem chromosomów a malowaniem chromosomów. Poza tym, w przeciwieństwie do prążkowania chromosomów, technika malowania chromosomów wymaga sond znakowanych fluorescencyjnie, specyficznych dla sekwencji.
Podsumowanie – opaski na chromosomach a malowanie chromosomów
Wstęgi chromosomów i malowanie chromosomów to dwie techniki stosowane do wizualizacji chromosomów, zwykle w metafazie. Obie techniki pomagają w identyfikacji liczbowych i strukturalnych aberracji chromosomowych oraz chorób genetycznych. Pasmowanie chromosomów to technika barwienia, która wyświetla określone regiony chromosomów w ciemnych i jasnych prążkach, które można rozróżnić. Tymczasem malowanie chromosomów jest rodzajem techniki hybrydyzacji, która wizualizuje określone regiony chromosomów w wyniku hybrydyzacji z sondami specyficznymi dla sekwencji znakowanymi fluorescencyjnie. To jest więc kluczowa różnica między tworzeniem pasm a malowaniem chromosomów.
