Kluczowa różnica między pBR322 i pUC19 polega na tym, że pBR322 jest wektorem plazmidowym o długości 4361 par zasad, podczas gdy pUC19 jest wektorem plazmidowym o długości 2686 par zasad.
Wektor klonujący to mały fragment DNA, który może być stabilnie utrzymywany w organizmie. Jest to również mały fragment DNA, do którego można wstawić obcy fragment DNA w celu klonowania. Wektor zawiera ważne cechy, które umożliwiają wygodne wstawienie obcego fragmentu DNA do wektorów, takie jak miejsca restrykcyjne, marker selekcyjny, gen reporterowy i element ekspresji. Klonowanie po raz pierwszy przeprowadzono przy użyciu E.coli. Wektory do klonowania E. coli obejmują plazmidy, bakteriofagi, kosmidy i sztuczne chromosomy bakteryjne (BAC). Najczęściej stosowanymi wektorami są plazmidy poddane inżynierii genetycznej. pBR322 i pUC19 to dwa rodzaje wektorów plazmidowych.
Co to jest pBR322?
pBR322 to wektor plazmidowy. Jest to jeden z pierwszych szeroko stosowanych wektorów do klonowania E. coli. Wektor ten został po raz pierwszy stworzony w 1977 roku w laboratorium Herberta Boyera na Uniwersytecie Kalifornijskim w San Francisco. Jest to okrągły, dwuniciowy DNA o długości 4361 par zasad.
Rysunek 01: pBR322
Ten wektor plazmidowy ma specjalne cechy. Zwykle ma dwa geny oporności na antybiotyki: gen bla kodujący białko oporności na ampicylinę (AmpR) oraz gen tetA kodujący oporność na tetracyklinę (TetR) białko. Ponadto zawiera początek replikacji pMB1. Ten wektor plazmidowy zawiera również gen rop, który koduje restryktor liczby kopii plazmidu. Ponadto wektor ten posiada unikalne miejsca restrykcyjne dla ponad 40 enzymów restrykcyjnych. Jedenaście z tych czterdziestu miejsc restrykcyjnych leży w genie TetR. Istnieją dwa miejsca restrykcyjne dla enzymów restrykcyjnych Hindlll i ClaI w promotorze genu TetR. Ponadto w genie AmpR znajduje się sześć bardzo ważnych miejsc restrykcyjnych. pBR322 jest wektorem do klonowania o małej liczbie kopii. W przybliżeniu dostarcza 20 kopii plazmidu na komórkę bakteryjną. Masa cząsteczkowa wektora wynosi 2,83×106 d altonów.
Co to jest pUC19?
pUC19 to wektor plazmidowy o długości 2686 par zasad. Jest to jeden z serii wektorów plazmidowych stworzonych przez Joachima Messinga i współpracowników. Wczesne prace nad tą serią plazmidów prowadzono na Uniwersytecie Kalifornijskim. Jest to okrągłe, dwuniciowe DNA.
Rysunek 02: pUC19
Ten wektor plazmidowy zawiera również ważne cechy. Posiada N-końcowy fragment genu β-gluktozydazy (lacz). Ma również region wielokrotnego klonowania (MCS). Region ten podzielony jest na kodony 6 i 7 genu lac. Region MCS zapewnia wiele miejsc restrykcyjnych endonukleaz. Oprócz genu β-gluktozydazy, pUC19 koduje również gen oporności na ampicylinę (AmpR). Ponadto początek replikacji pochodzi z plazmidu pMB1. Chociaż pUC19 ma niewielkie rozmiary, ma dużą liczbę kopii (500-700 kopii na komórkę bakteryjną). Masa cząsteczkowa tego wektora plazmidowego wynosi 1,75×106 d altonów.
Jakie są podobieństwa między pBR322 a pUC19?
- pBR322 i pUC19 to dwa rodzaje wektorów plazmidowych.
- Są popularnymi wektorami klonowania dla coli.
- Oba wektory plazmidowe mają tę samą formę początku replikacji co plazmid pMB1.
- Te wektory mają wiele miejsc restrykcyjnych.
- Oba wektory plazmidowe mają gen oporności na ampicylinę jako marker selekcyjny.
Jaka jest różnica między pBR322 a pUC19?
pBR322 jest wektorem plazmidowym o długości 4361 par zasad, podczas gdy pUC19 jest wektorem plazmidowym o długości 2686 par zasad. Jest to więc kluczowa różnica między pBR322 a pUC19. Ponadto pBR322 jest wektorem plazmidowym o małej liczbie kopii, podczas gdy pUC19 jest wektorem plazmidowym o dużej liczbie kopii.
Poniższa infografika przedstawia różnice między pBR322 i pUC19 w formie tabelarycznej do bezpośredniego porównania.
Podsumowanie - pBR322 kontra pUC19
Najczęściej używane wektory do klonowania E.coli to genetycznie zmodyfikowane plazmidy.pBR322 i pUC19 to dwa typy wektorów plazmidowych. pBR322 jest wektorem plazmidowym o długości 4361 par zasad, podczas gdy pUC19 jest wektorem plazmidowym o długości 2686 par zasad. To jest kluczowa różnica między pBR322 a pUC19.
