Kluczowa różnica między HEK293 a HEK293t polega na tym, że HEK293 to unieśmiertelniona linia komórkowa pochodząca z zarodkowej ludzkiej nerki, która jest transfekowana pociętym ludzkim adenowirusem typu 5DNA, podczas gdy HEK293t jest potomną linią komórkową pochodzącą z oryginalnej linii komórkowej HEK293, która jest transfekowany wektorem plazmidowym niosącym początek replikacji SV40.
Transfekcja jest zwykle definiowana jako proces wprowadzania obcego DNA i RNA do komórek w celu wpłynięcia na ich genotyp i fenotyp. Takie wprowadzenie obcych kwasów nukleinowych różnymi metodami biologicznymi, chemicznymi i fizycznymi może zmienić właściwości komórki. Ostatecznie pozwala to na badanie funkcji genów i ekspresji białek w kontekście komórki. HEK293 i HEK293t to dwie linie komórkowe, które od wielu lat są szeroko stosowane w badaniach biologii komórki ze względu na ich skłonność do transfekcji.
Co to jest HEK293?
HEK293 to unieśmiertelniona linia komórkowa pochodząca z embrionalnej ludzkiej nerki, która jest transfekowana pociętym ludzkim adenowirusem typu 5DNA w celu wytworzenia wielu rekombinowanych białek. HEK293 zostały pierwotnie wyizolowane z ludzkich komórek nerkowych przez holenderskiego biologa Alexa Van der Eb w 1973 roku. Komórki te hodowano w hodowli tkankowej płodu żeńskiego. Później zostały one transfekowane pociętym ludzkim adenowirusem typu 5DNA przez Franka Grahama, doktora habilitowanego w laboratorium Van der Eb. Ta linia komórkowa została nazwana HEK293, ponieważ była to eksperyment Franka 293rd.
Rysunek 01: HEK293
Włączenie genów adenowirusowych do genomu komórki HEK umożliwia tym komórkom bardzo wydajną produkcję dużej ilości rekombinowanych białek. Ponadto wektor adenowirusowy zawiera region promotora CMV; w związku z tym dodatkowo zwiększa tę wydajność. Ta linia komórkowa została wykorzystana jako gospodarz do badań nad ekspresją genów. Ta linia komórkowa jest również wykorzystywana przez przemysł biotechnologiczny do produkcji białek terapeutycznych do terapii genowej.
Co to jest HEK293t?
HEK293t jest potomną linią komórkową pochodzącą z oryginalnej linii komórkowej HEK293, która jest transfekowana wektorem plazmidowym niosącym początek replikacji SV40 w celu wytworzenia dużej ilości zrekombinowanych białek. HEK293t to ludzka linia komórkowa, w której zachodzi ekspresja zmutowanej wersji dużego antygenu T SV40. HEK293t został stworzony w laboratorium Michele Carlos w Stanford poprzez stabilną transfekcję linii komórkowej HEK29E plazmidem kodującym wrażliwego na temperaturę mutanta dużego antygenu T SV40. Pierwotnie nosił nazwę 293/tsA1609neo. Dzieje się tak, ponieważ transfekcja wykorzystana do stworzenia linii komórkowej, która nadaje oporność na neomycynę i ekspresję allelu tsA 1609 dużego antygenu T SV40.
Rysunek 02: HEK293t
Dzięki ekspresji zmutowanej wersji dużego antygenu T SV40, transfekowane plazmidy z początkiem replikacji SV40 mogą znacznie zwiększyć ilość rekombinowanego białka. Ta linia komórkowa jest powszechnie stosowana w przemyśle biotechnologicznym do ekspresji białek i produkcji rekombinowanych retrowirusów.
Jakie są podobieństwa między HEK293 a HEK293t?
- HEK293 i HEK293t to dwie linie komórkowe, które były szeroko stosowane w badaniach biologii komórki ze względu na ich skłonność do transfekcji.
- Obie linie komórkowe pochodzą z laboratorium.
- Te linie komórkowe mogą znacznie zwiększyć produkcję rekombinowanego białka.
- Są one wytwarzane poprzez transfekcję embrionalnych komórek nerki człowieka wektorem plazmidowym.
Jaka jest różnica między HEK293 a HEK293t?
HEK293 to unieśmiertelniona linia komórkowa pochodząca z embrionalnej ludzkiej nerki, która jest transfekowana pociętym ludzkim adenowirusem typu 5DNA. W przeciwieństwie do tego, HEK293t jest potomną linią komórkową pochodzącą z oryginalnej linii komórkowej HEK293, która jest transfekowana wektorem plazmidowym niosącym początek replikacji SV40. Jest to więc kluczowa różnica między HEK293 a HEK293t. Ponadto HEK293 nie wyraża zmutowanej wersji dużego antygenu T SV40. Z drugiej strony, HEK293t wyraża zmutowaną wersję dużego antygenu T SV40.
Poniższa infografika przedstawia różnice między HEK293 i HEK293t w formie tabelarycznej do bezpośredniego porównania.
Podsumowanie – HEK293 kontra HEK293t
HEK293 i HEK293t to dwie linie komórkowe, które były szeroko stosowane w badaniach biologii komórki ze względu na ich stały wzrost i skłonność do transfekcji. HEK293 jest unieśmiertelnioną linią komórkową pochodzącą z embrionalnej ludzkiej nerki, która jest transfekowana pociętym ludzkim adenowirusem typu 5DNA, podczas gdy HEK293t jest potomną linią komórkową pochodzącą z oryginalnej linii komórkowej HEK293, która jest transfekowana wektorem plazmidowym niosącym początek replikacji SV40. W ten sposób podsumowuje różnicę między HEK293 i HEK293t.
