Kluczowa różnica między Elisa a Western blot polega na tym, że Elisa lub test immunoenzymatyczny jest narzędziem diagnostycznym, które wykrywa, czy pacjent był narażony na konkretny typ wirusa lub inny czynnik zakaźny, podczas gdy Western blot jest techniką, która wykrywa określone białko z próbki białka.
AIDS stało się problemem globalnym, a częstość występowania tej śmiertelnej choroby wzrosła alarmująco w ciągu ostatnich kilkudziesięciu lat. Testy na HIV wykrywają obecność ludzkiego wirusa niedoboru odporności (HIV), który powoduje ten zespół. Spośród różnych testów na HIV, ELISA i Western Blot są dziś bardzo popularne. ELISA to skrót od enzymatycznego testu immunosorpcyjnego, który jest techniką oznaczeń płytkowych. Jest to test immunoenzymatyczny stosowany do wykrywania przeciwciał HIV. Western blot wykrywa specyficzne białko z mieszaniny białek przy użyciu znakowanego przeciwciała.
Kluczowa różnica
1. Przegląd i kluczowa różnica
2. Co to jest Elisa
3. Co to jest Western Blot
4. Podobieństwa między Elisą a Western Blot
5. Porównanie obok siebie – Elisa vs Western Blot w formie tabelarycznej
6. Podsumowanie
Czym jest Elisa?
ELISA, co oznacza test immunoenzymatyczny, był pierwszym testem zaprojektowanym głównie do wykrywania wirusa HIV. Jest to test oparty na płytkach. Służy do wykrywania przeciwciał HIV, a ten test wykazuje wysoką czułość. W tej technice antygeny w próbce wiążą się z unieruchomionymi przeciwciałami na powierzchni stałej. Po unieruchomieniu antygeny tworzą kompleksy z przeciwciałami połączonymi z enzymami. Następnie te sprzężone enzymy inkubują się z odpowiednim substratem.
Rysunek 01: ELISA
Reakcja substrat-enzym daje mierzalny kolorowy produkt. Mierząc ilość produktu, można określić ilość antygenów obecnych w próbce. Dlatego ELISA jest bardzo specyficzną i wyrafinowaną techniką, która wymaga uwagi dobrze wykwalifikowanych techników. Jest to również czasochłonny proces wymagający zaawansowanego sprzętu.
Co to jest Western Blot?
Western blotting to technika, która umożliwia wykrycie określonego białka z mieszaniny białek. Western blot to membrana stosowana podczas procedury blottingu w celu uzyskania lustrzanego obrazu wzorców białkowych w żelu poliakrylamidowym SDS. Membrana stosowana do western blottingu składa się głównie z nitrocelulozy lub difluorku poliwinylidenu (PVDF). Błonę z przeniesionym białkiem można wykorzystać do identyfikacji konkretnego białka. Do wykrycia pożądanego białka przez hybrydyzację wymagane jest wysokiej jakości przeciwciało. Przeciwciało wiąże się ze swoim specyficznym antygenem i ujawnia obecność pożądanego antygenu, którym jest białko.
Rysunek 02: Western Blot
Transfer białek z żelu poliakryloamidowego SDS do Western blot przeprowadza się metodą elektroblottingu. Jest to skuteczna i szybka metoda, która powoduje, że białka wychodzą z żelu elektroforetycznie i przechodzą na błonę nitrocelulozową (western blot).
Western blotting jest użyteczny w wykrywaniu przeciwciał anty-HIV w próbce ludzkiej surowicy. Western blot może być również używany jako test potwierdzający zakażenie wirusem zapalenia wątroby typu B i ostateczny test na chorobę szalonych krów.
Jakie są podobieństwa między Elisą a Western Blot?
- Elisa i Western blot to dwa rodzaje technik stosowanych do diagnozowania HIV.
- Obie metody są oparte na immunodetekcji.
- Opierają się na tworzeniu kompleksu przeciwciało-białko.
- Obie metody mogą analizować białka.
- Elisa i technika Western blot to czasochłonne techniki.
- Do wykonywania tych technik wymagany jest dobrze wyszkolony i wykwalifikowany personel.
Jaka jest różnica między Elisą a Western Blot?
ELISA to bardzo czuła i bardzo wyrafinowana metoda, która wykrywa obecność antygenu i przeciwciała we krwi pacjenta, podczas gdy western blot to technika, która wykrywa określone białko z mieszaniny białek. To jest kluczowa różnica między Elisą a westernem. Elisa jest zarówno jakościowa, jak i ilościowa. Natomiast western blot jest jakościowy. Czasami jest to półilościowe. Biorąc pod uwagę czas potrzebny na test, test Elisy jest czasochłonny, podczas gdy Western blot jest bardziej czasochłonny niż Elisa.
Poniższa infografika podsumowuje różnicę między Elisą a western blot.
Podsumowanie – Elisa kontra Western Blot
ELISA to bardzo czuła i bardzo wyrafinowana metoda, która wykrywa obecność antygenu i przeciwciała w naszej krwi. Z drugiej strony, technika Western blotting została opracowana w celu identyfikacji konkretnego białka z mieszaniny białek. To jest kluczowa różnica między Elisą a Western blot. ELISA był pierwszym testem zaprojektowanym do wykrywania wirusa HIV. W celu potwierdzenia wyników testu ELISA można użyć Western Blot. Zarówno ELISA, jak i Western Blot są uważane za pośrednie metody wykrywania HIV.
