Kluczowa różnica między RIA a ELISA polega na tym, że test radioimmunologiczny (RIA) jest techniką testu immunologicznego, która wykorzystuje radioizotopy do wykrywania kompleksów antygen-przeciwciało, podczas gdy test immunoenzymatyczny (ELISA) jest techniką testu immunologicznego, która wykorzystuje enzymy do wykrywania antygenu -kompleksy przeciwciał.
Wykrywanie specyficznych białek, takich jak antygeny, jest niezwykle ważne w diagnostyce chorób. Dlatego RIA i ELISA to dwie techniki testów immunologicznych stosowane w laboratoriach do szybkiego wykrywania określonych białek, zwłaszcza antygenów. Ogólnie rzecz biorąc, specyficzne przeciwciało wiąże się z docelowym antygenem i tworzy widoczny kompleks znany jako precypityna. Te kompleksy przeciwciał i antygenów można zidentyfikować za pomocą różnych technik. Technika wykrywania kompleksu antygen-przeciwciało przy użyciu radioizotopów jest znana jako RIA, a technika wykrywania kompleksu antygen-przeciwciało przy użyciu enzymów jest znana jako ELISA.
Co to jest RIA?
Radioimmunoassay (RIA) to technika testu immunologicznego, która wykrywa kompleksy antygenów i przeciwciał przy użyciu radioizotopów. Rosalyn Sussman Yalow opracowała tę technikę w 1960 z pomocą Solomona Bersona. Za to niezwykłe odkrycie Rosalyn Sussman Yalow zdobyła Nagrodę Nobla w dziedzinie medycyny w 1977 roku. Zazwyczaj w teście radioimmunologicznym znana ilość antygenu jest najpierw radioaktywna. Ta technika często wykorzystuje gamma-radioaktywne izotopy jodu, zwane 125-I, do znakowania antygeny. Te radioizotopy zwykle przyłączają się do aminokwasu tyrozyny antygenu. Następnie znakowany radioaktywnie antygen miesza się z przeciwciałem. W rezultacie znakowany radioaktywnie antygen i przeciwciało specyficznie wiążą się ze sobą.
Później dodawana jest próbka surowicy, która zawiera nieznaną ilość tego samego antygenu. Powoduje to, że nieznakowany antygen z surowicy konkuruje z radioznakowanym antygenem o miejsca wiązania przeciwciała. Wraz ze wzrostem stężenia nieznakowanego antygenu, więcej z nich wiąże się z przeciwciałem, wypierając wariant znakowany radioaktywnie. W ten sposób zmniejsza stosunek radioznakowanego antygenu związanego z przeciwciałem do wolnego radioznakowanego antygenu. Pod koniec procedury związane antygeny są oddzielane. Ostatecznie radioaktywność wolnych antygenów w pozostałym supernatancie mierzy się za pomocą licznika gamma.
Co to jest test ELISA?
ELISA to technika testu immunologicznego, która wykrywa kompleksy antygenów i przeciwciał przy użyciu enzymów. Jest to biochemiczny test analityczny opisany po raz pierwszy przez Engvalla i Perlmanna w 1971 roku. W większości prostych form technik ELISA, antygeny próbki pacjenta są przyczepione do stałej powierzchni. Następnie na powierzchnię nakładane jest pasujące przeciwciało, aby mogło związać się z antygenem.
Rysunek 01: ELISA
To konkretne przeciwciało jest połączone z enzymem. Później wszelkie niezwiązane przeciwciała są usuwane przez przemycie detergentem. W ostatnim etapie tej techniki dodawany jest substrat enzymu. Jeśli występuje prawidłowe wiązanie antygenu i przeciwciała, następująca reakcja wytwarza wykrywalny sygnał koloru, najczęściej zmianę koloru.
Jakie są podobieństwa między RIA a ELISA?
- RIA i ELISA to techniki testów immunologicznych.
- Obie techniki umożliwiają tworzenie kompleksów antygenu i przeciwciała.
- Te techniki można wykorzystać do wykrywania nieznanych białek w próbkach.
- Oba są stosowane w diagnostyce chorób w laboratoriach.
- Oba są bardzo specyficznymi i wrażliwymi technikami.
Jaka jest różnica między RIA a ELISA?
RIA to technika testu immunologicznego do wykrywania kompleksu antygen-przeciwciało przy użyciu radioizotopów. ELISA to technika testu immunologicznego do wykrywania kompleksu antygen-przeciwciało przy użyciu enzymów. To jest więc kluczowa różnica między RIA a ELISA. Ponadto w technice RIA antygen jest znakowany, natomiast w teście ELISA znakowane jest przeciwciało. Ponadto w technice RIA cząsteczkami znakującymi są radioizotopy, podczas gdy w ELISA cząsteczkami znakującymi są enzymy. Jest to więc kolejna różnica między RIA a ELISA.
Poniższa infografika pokazuje więcej różnic między RIA i ELISA w formie tabelarycznej.
Podsumowanie – RIA vs ELISA
Testy immunologiczne odgrywają bardzo ważną rolę w różnych środowiskach bioanalitycznych, takich jak diagnostyka kliniczna, analiza biofarmaceutyczna, monitorowanie środowiska, bezpieczeństwo biologiczne i testowanie żywności. Od lat 60. opracowano szeroką gamę testów immunologicznych. RIA i ELISA są technikami testów immunologicznych. RIA to technika testu immunologicznego do wykrywania kompleksu antygen-przeciwciało przy użyciu radioizotopów. ELISA to technika testu immunologicznego do wykrywania kompleksu antygen-przeciwciało przy użyciu enzymów. Oto podsumowanie różnicy między RIA a ELISA.
