Kluczowa różnica – barwienie Grama vs kultura
Barwienie metodą Grama to technika barwienia, która służy do różnicowania bakterii na dwie grupy w zależności od grubości warstwy peptydoglikanu w ich ścianie komórkowej. Hodowla to metoda hodowli i utrzymywania mikroorganizmów w warunkach laboratoryjnych do różnych analiz. Kluczową różnicą między barwnikiem grama a kulturą jest ich funkcja; gram szczep technika barwienia bakterii, w której hodowla jest metodą hodowli i utrzymywania mikroorganizmów.
Co to jest plama Grama?
Barwienie metodą Grama to ważna technika barwienia różnicowego stosowana do identyfikacji bakterii w mikrobiologii. Technika ta została wprowadzona przez duńskiego bakteriologa Hansa Christiana Grama w 1884 roku. Barwienie metodą Grama dzieli bakterie na dwie główne grupy: Gram-dodatnie i Gram-ujemne; są one bardzo ważne w klasyfikacji i identyfikacji bakterii. Barwienie metodą Grama jest wykonywane jako wstępny etap charakterystyki bakterii.
Bakterie są pogrupowane na podstawie różnic w ich ścianie komórkowej. Bakterie Gram-dodatnie zawierają grubą warstwę peptydoglikanu w swojej ścianie komórkowej, podczas gdy bakterie Gram-ujemne zawierają cienką warstwę peptydoglikanu w swojej ścianie komórkowej, jak pokazano na rycinie 01. Wynik barwienia Gram będzie oparty na różnicy grubości warstwy peptydoglikanu ściana komórkowa.
Rysunek 1: Bakterie Gram-dodatnie i bakterie Gram-ujemne
Barwienie metodą Grama odbywa się przy użyciu czterech różnych odczynników, a mianowicie; bejca pierwotna, zaprawa, środek odbarwiający i barwienie kontrastowe. Fiolet krystaliczny i safranina służą odpowiednio jako barwniki podstawowe i kontrujące, natomiast gram jodu i 95% alkoholu służą odpowiednio jako zaprawa i odbarwiacz.
Podstawowe etapy barwienia gramami
- Rozmaz bakteryjny jest przygotowywany na czystym szkiełku, utrwalany na gorąco i chłodzony.
- Rozmaz jest zalewany krystalicznym fioletem na 1 – 2 minuty.
- Rozmaz jest spłukiwany wolno bieżącą wodą z kranu, aby usunąć nadmiar plam.
- Gramy jodu są nakładane na rozmaz na 1 minutę.
- Rozmaz jest spłukiwany wolno bieżącą wodą z kranu
- Rozmaz jest myty 95% alkoholem przez 2-5 sekund i spłukiwany wolno bieżącą wodą z kranu.
- Rozmaz jest barwiony kontrastowo safraniną przez 1 minutę
- Rozmaz spłukuje się wolno bieżącą wodą z kranu, suszy i obserwuje pod mikroskopem.
Na końcu barwienia gram-ujemnego bakterie gram-ujemne będą obserwowane w kolorze różowym, podczas gdy bakterie gram-dodatnie będą obserwowane w kolorze fioletowym, jak pokazano na rysunku 02. O wyniku barwienia gram-ujemnego decyduje grubość warstwy peptydoglikanu w ich ścianie komórkowej. Podczas etapu odbarwiania, plama pierwotna i zaprawa są łatwo usuwane z bakterii Gram-ujemnych i stają się bezbarwne, ponieważ mają cienką warstwę peptydoglikanu. Barwnik pierwotny jest zatrzymywany w gram-dodatnich bakteriach, ponieważ mają one grubą warstwę peptydoglikanu. Barwienie kontrastowe nie będzie skuteczne w przypadku bakterii Gram-dodatnich ze względu na zatrzymanie pierwotnego barwnika. Tak więc bakterie Gram-dodatnie będą widoczne w podstawowym kolorze plamy, tj. w kolorze fioletowym. Barwnik kontrastowy zabarwi bakterie Gram-ujemne i będzie widoczny w wybranym kolorze, który jest kolorem safraniny. W związku z tym łatwo jest podzielić bakterie na dwie grupy na podstawie barwienia grama i jest to cenne w różnicowaniu i identyfikacji bakterii.
Rysunek 2: Odmiana Grama
Czym jest kultura?
Hodowla drobnoustrojów to metoda hodowli i utrzymywania mikroorganizmów w warunkach laboratoryjnych do różnych celów. Kultury hoduje się na pożywkach stałych, półstałych i płynnych w zależności od rodzaju i celu hodowli drobnoustrojów. Kulturom dostarcza się niezbędnych składników odżywczych i warunków wzrostu wymaganych przez mikroorganizmy. Istnieją różne składniki podłoża hodowlanego, takie jak źródło energii, źródło węgla, źródło azotu, minerały, mikroelementy, woda, środek zestalający itp. Optymalną temperaturę, tlen i pH należy dostosować do rodzaju hodowanego mikroorganizmu.
Istnieją różne rodzaje kultur mikrobiologicznych; na przykład kultura okresowa, hodowla ciągła, hodowla stab, hodowla na płytkach agarowych, hodowla bulionowa itp. W zależności od składu podłoża hodowlanego, istnieją różne rodzaje podłoży hodowlanych znane jako podłoża syntetyczne, podłoża półsyntetyczne i podłoża naturalne. Kultury drobnoustrojów są przygotowywane w sterylnych warunkach w specjalnej komorze zwanej laminarnym przepływem powietrza. Pożywkę hodowlaną i naczynia szklane sterylizuje się przed zaszczepieniem pożądanego drobnoustroju. W odpowiednich sterylnych warunkach docelowy mikroorganizm jest przenoszony do wysterylizowanej pożywki i inkubowany w optymalnej temperaturze. Wewnątrz pożywki mikroorganizmy będą rosły i rozmnażały się przy użyciu dostarczonych składników odżywczych.
Rysunek 3: Hodowla bakterii na płytce
Jaka jest różnica między barwieniem metodą Grama a kulturą?
Barwienie grama kontra kultura |
|
| Szczep Grams to technika barwienia różnicowego stosowana do różnicowania i identyfikacji bakterii. | Kultura drobnoustrojów to metoda hodowli mikroorganizmów w laboratorium. |
| Komponenty | |
| Wykorzystywane są różne odczynniki, w tym dwa barwniki. | Wykorzystuje się różne podłoża hodowlane, takie jak stałe, półstałe i płynne podłoża składające się z substancji odżywczych i innych niezbędnych warunków. |
| Podstawowe funkcje | |
| Umożliwia to grupowanie bakterii w dwie grupy: gram-ujemną i gram-dodatnią. | Umożliwia to namnażanie mikroorganizmów do różnych celów. |
| Baza | |
| Wynik barwienia metodą Grama jest oparty na różnicach w warstwie peptydoglikanu ściany komórkowej. | Mikroorganizmy będą rosły i rozmnażały się w pożywce hodowlanej. |
| Wynik | |
| Bakterie Gram-ujemne są widoczne w kolorze różowym, a bakterie Gram-dodatnie są widoczne w kolorze fioletowym. | Na płytkach widoczne są kolonie mikroorganizmów. Na podłożach płynnych mikroorganizmy są w formie zawieszonej. |
Podsumowanie – Barwienie Grama kontra kultura
Hodowle drobnoustrojów są przygotowywane i utrzymywane w warunkach laboratoryjnych do różnych celów, takich jak przechowywanie, testowanie, oczyszczanie chemiczne itp. Barwienie metodą Grama to procedura barwienia, która dzieli bakterie na dwie główne grupy zwane bakteriami Gram-ujemnymi i Gram-dodatnimi. Dlatego różnica między barwieniem w gramach a kulturą polega na tym, że barwienie w gramach jest techniką barwienia bakterii, podczas gdy kultura jest metodą hodowli i utrzymywania mikroorganizmów w laboratoriach.
