Kluczowa różnica między filtracją żelową a chromatografią żelową polega na tym, że faza ruchoma chromatografii żelowej jest roztworem wodnym, podczas gdy faza ruchoma chromatografii żelowej jest rozpuszczalnikiem organicznym.
Zarówno filtracja żelowa, jak i chromatografia żelowo-permeacyjna należą do kategorii chromatografii wykluczania, w której możemy oddzielić cząsteczki w roztworze w zależności od ich wielkości. Oznacza to, że czasami możemy rozdzielić cząsteczki według ich masy cząsteczkowej. Zwykle stosujemy te techniki do oddzielania złożonych cząsteczek, takich jak białka, a na skalę przemysłową do oddzielania materiałów polimerowych. Główna różnica między filtracją żelową a chromatografią żelowo-permeacyjną dotyczy fazy ruchomej, której używamy w każdej technice.
Co to jest chromatografia filtracji żelowej?
Chromatografia żelowa to forma chromatografii wykluczania, w której jako fazę ruchomą stosujemy roztwór wodny. Dlatego w większości przypadków fazą ruchomą, której używamy w tej technice, jest bufor wodny. Do tego rozdziału używamy również kolumny chromatograficznej i musimy wypełnić kolumnę porowatymi kulkami. Zwykle jako materiał porowaty przydatne są Sephadex i agaroza. Stąd te materiały stanowią stacjonarną fazę naszego eksperymentu. Co więcej, możemy wykorzystać wielkość porów tych kulek do określenia wielkości oddzielanych makrocząsteczek. Jest to jednak tylko szacunek.
Rysunek 01: Aparatura do chromatografii żelowej
Głównym zastosowaniem tej techniki jest oddzielanie białek i innych materiałów rozpuszczalnych w wodzie w zależności od wielkości. Technika polega na uwięzieniu małych cząsteczek w porach fazy stacjonarnej (perełkach), podczas gdy duże cząsteczki eluują się przez żel. Dlatego pierwsza frakcja zawiera duże cząsteczki. Następnie możemy użyć innego rozpuszczalnika, który może usunąć małe cząsteczki z porów. Wtedy nasza druga frakcja zawiera małe cząsteczki.
Co to jest chromatografia żelowa?
Chromatografia żelowo-permeacyjna jest formą chromatografii wykluczania, w której jako fazę ruchomą stosujemy rozpuszczalnik organiczny. Dlatego możemy do tego celu użyć roztworów takich jak heksan i toluen.
Rysunek 02: Instrument do chromatografii przenikania żelu
Faza stacjonarna jest materiałem porowatym, takim samym jak w chromatografii żelowej. Ta technika jest często stosowana do polimerów i innych materiałów rozpuszczalnych w organiźmie. Metoda działania tej techniki jest podobna do chromatografii żelowej.
Jaka jest różnica między filtracją żelową a chromatografią żelową?
Filtracja żelowa i chromatografia żelowo-permeacyjna to dwie formy chromatografii wykluczania, która polega na rozdzielaniu cząsteczek w próbce zgodnie z rozmiarem cząsteczek. Jedyną różnicą między filtracją żelową a chromatografią żelowo-permeacyjną jest wykorzystywana faza ruchoma, a co za tym idzie zastosowanie techniki. Dlatego kluczowa różnica między filtracją żelową a chromatografią żelową polega na tym, że faza ruchoma chromatografii żelowej jest roztworem wodnym, podczas gdy faza ruchoma chromatografii żelowej jest rozpuszczalnikiem organicznym.
Poniższa infografika przedstawia różnicę między filtracją żelową a chromatografią żelowo-permeacyjną w formie tabelarycznej.
Podsumowanie – filtracja żelowa a chromatografia żelowo-permeacyjna
Chromatografia wykluczania rozmiarów jest podzielona na dwa główne typy, takie jak filtracja żelowa i chromatografia żelowo-permeacyjna. Kluczowa różnica między filtracją żelową a chromatografią żelową polega na tym, że faza ruchoma chromatografii żelowej jest roztworem wodnym, podczas gdy faza ruchoma chromatografii żelowej jest rozpuszczalnikiem organicznym.