Kluczowa różnica między chromatografią jonowymienną a chromatografią wykluczenia wielkości polega na tym, że chromatografia jonowymienna jest używana do analizy substancji jonowych zgodnie z ładunkiem, podczas gdy chromatografia wykluczania jest stosowana do analizy dużych cząsteczek zgodnie z ich rozmiarem.
Chromatografia to technika analityczna, którą można wykorzystać do analizy różnych mieszanin. Techniki chromatograficzne są nazywane zgodnie z parametrem użytym do analizy substancji – m.in. chromatografia wykluczania wielkości, chromatografia jonowymienna itp.
Co to jest chromatografia jonowymienna?
Chromatografia jonowymienna to technika analityczna, dzięki której możemy analizować substancje jonowe. Często przydatna jest analiza anionów i kationów nieorganicznych (tj. anionów chlorkowych i azotanowych oraz kationów potasowych i sodowych). Chociaż nie jest to bardzo powszechna metoda, możemy za jej pomocą analizować jony organiczne. Co więcej, możemy wykorzystać tę technikę do oczyszczania białek, ponieważ białka są naładowane cząsteczkami przy określonych wartościach pH. Tutaj używamy stałej fazy stacjonarnej, do której mogą przyczepiać się naładowane cząstki. Na przykład, możemy użyć kopolimerów żywicy polistyren-diwinylobenzen jako stałego nośnika.
Rysunek 01: Teoria chromatografii jonowymiennej
Aby wyjaśnić to dokładniej, faza stacjonarna zawiera utrwalone jony, takie jak aniony siarczanowe lub kationy amin czwartorzędowych. Każdy z nich powinien kojarzyć się z przeciwjonem (jonem o przeciwnym ładunku), jeśli mamy zachować neutralność tego układu. Jeśli przeciwjonem jest kation, wtedy nazywamy układ żywicą kationowymienną. Ale jeśli przeciwjonem jest anion, układem jest żywica anionowymienna. Ponadto istnieje pięć głównych etapów chromatografii jonowymiennej:
- Początkowy etap
- Adsorpcja celu
- Rozpoczęcie elucji
- Koniec elucji
- Regeneracja
Co to jest chromatografia wykluczania rozmiarów?
Chromatografia wykluczania wielkości lub SEC to technika analityczna, w której cząsteczki w mieszaninie mogą być rozdzielone według ich wielkości i masy cząsteczki. Zwykle działa z dużymi cząsteczkami zwanymi makrocząsteczkami. Zazwyczaj do analizy stosuje się roztwór wodny. Wtedy nazywa się to chromatografią żelową. W przypadku rozpuszczalnika organicznego nazywa się to chromatografią żelowo-permeacyjną.
Chromatografia żelowa to forma chromatografii wykluczania, w której jako fazę ruchomą stosujemy roztwór wodny. Dlatego fazą ruchomą, którą często stosujemy w tej technice, jest bufor wodny. Do tego rozdziału używamy również kolumny chromatograficznej i musimy wypełnić kolumnę porowatymi kulkami. Zwykle jako materiał porowaty przydatne są Sephadex i agaroza. Stąd te materiały stanowią stacjonarną fazę naszego eksperymentu. Co więcej, możemy wykorzystać wielkość porów tych kulek do określenia wielkości oddzielanych makrocząsteczek. Jest to jednak tylko szacunek.
Rysunek 02: Aparat do chromatografii wykluczania rozmiarów
Chromatografia żelowo-permeacyjna jest formą chromatografii wykluczania, w której jako fazę ruchomą stosujemy rozpuszczalnik organiczny. Dlatego możemy do tego celu wykorzystać roztwory takie jak heksan i toluen. Faza stacjonarna to materiał porowaty, taki sam jak w chromatografii żelowej. Ta technika jest często stosowana do polimerów i innych materiałów rozpuszczalnych w organiźmie. Metoda działania tej techniki jest podobna do chromatografii żelowej.
Jaka jest różnica między chromatografią jonowymienną a chromatografią wykluczania?
Chromatografia to technika analityczna, którą można wykorzystać do analizy różnych mieszanin. Kluczową różnicą między chromatografią jonowymienną a chromatografią wykluczenia wielkości jest to, że chromatografia jonowymienna jest używana do analizy substancji jonowych zgodnie z ładunkiem, podczas gdy chromatografia wykluczania jest stosowana do analizy dużych cząsteczek zgodnie z rozmiarem.
Poniższa infografika zawiera więcej informacji na temat różnicy między chromatografią jonowymienną a chromatografią wykluczania rozmiarów.
Podsumowanie – Wymiana jonowa a chromatografia wykluczania rozmiaru
Chromatografia to technika analityczna, którą można wykorzystać do analizy różnych mieszanin. Kluczową różnicą między chromatografią jonowymienną a chromatografią wykluczenia wielkości jest to, że chromatografia jonowymienna jest używana do analizy substancji jonowych zgodnie z ładunkiem, podczas gdy chromatografia wykluczania jest stosowana do analizy dużych cząsteczek zgodnie z rozmiarem.
