Kluczowa różnica między reakcją kinetyczną a reakcją w punkcie końcowym polega na tym, że w metodzie reakcji kinetycznej mierzymy różnicę w absorbancji między dwoma punktami podczas postępu reakcji, podczas gdy w metodzie reakcji w punkcie końcowym mierzymy całkowitą ilość anality biorące udział w reakcji.
Metoda reakcji kinetycznej i metoda reakcji w punkcie końcowym są przydatne w analizie enzymatycznej. Te metody wykorzystujemy głównie w chemii klinicznej. Poza tymi dwiema metodami istnieje inna metoda; metoda ustalonego czasu.
Co to jest reakcja kinetyczna?
Metoda reakcji kinetycznej to metoda analizy stosowana w chemii klinicznej w celu określenia różnicy w absorbancji między dwoma punktami postępu reakcji. Tutaj używamy określonego okresu czasu do tego określenia. Powinniśmy przyjąć tę determinację; stała ilość form produktu w monitorowanym przedziale czasu. Zwykle bierzemy pod uwagę krótki okres czasu (20 sekund do 1 minuty). Ma to na celu uniknięcie jakiegokolwiek efektu wynikającego z degradacji enzymu podczas postępu reakcji.
Przed rozpoczęciem reakcji należy przeprowadzić wstępną inkubację, aby uniknąć zakłóceń pochodzących od substancji innych niż analit. Podczas wstępnej inkubacji substancje te całkowicie reagują z układem odczynników. Istnieją dwa główne typy, takie jak;
- Typ narastający: reakcja przebiega dodatnio Tutaj początkowa absorbancja jest zawsze niższa niż końcowa absorbancja.
- Typ malejący: reakcja przebiega w sposób negatywny Początkowa absorbancja jest wyższą wartością niż końcowa absorbancja.
Co to jest reakcja w punkcie końcowym?
Metoda reakcji w punkcie końcowym to metoda analizy przydatna w chemii klinicznej do określenia całkowitej ilości analitów zużytych podczas postępu reakcji. w tej metodzie bierzemy pod uwagę punkt końcowy reakcji, a nie dwa konkretne punkty, jak w metodzie kinetycznej. Zwykle punkt końcowy pojawia się w ciągu 5 do 15 minut w temperaturze 37◦C.
Rysunek 01: Możemy użyć spektrofotometrów do pomiaru absorbancji
Reakcja może na końcu dać albo barwny produkt, albo bezbarwny produkt. Możemy jednak zmierzyć absorbancję tego produktu za pomocą spektrofotometru. Absorbancja próbki wzrasta z czasem. Osiąga stabilną wartość, która z czasem nie będzie się dalej zmieniać. To jest punkt końcowy reakcji.
Jaka jest różnica między reakcją kinetyczną a reakcją w punkcie końcowym?
Metoda reakcji kinetycznej to metoda analizy stosowana w chemii klinicznej w celu określenia różnicy w absorbancji między dwoma punktami postępu reakcji. Tutaj mierzymy różnicę absorbancji pomiędzy dwoma punktami postępu reakcji. Co więcej, czas potrzebny na tę reakcję wynosi około 20 sekund do 1 minuty. Natomiast metoda reakcji w punkcie końcowym jest metodą analityczną stosowaną w chemii klinicznej w celu określenia całkowitej ilości analitów zużytych podczas postępu reakcji. W tej metodzie mierzymy całkowitą ilość analitów biorących udział w reakcji. Ponadto czas potrzebny na tę reakcję wynosi od 5 do 15 minut.
Podsumowanie – Reakcja kinetyczna a reakcja w punkcie końcowym
Istnieją trzy główne metody reakcji, których używamy w chemii klinicznej do analizy reakcji enzymatycznych; metoda kinetyczna, metoda ustalonego czasu i metoda punktu końcowego. Różnica między reakcją kinetyczną a reakcją w punkcie końcowym polega na tym, że w metodzie reakcji kinetycznej mierzymy różnicę absorbancji pomiędzy dwoma punktami w trakcie przebiegu reakcji, natomiast w metodzie reakcji w punkcie końcowym mierzymy całkowitą ilość analitów biorących udział w reakcji.
