Kluczowa różnica – immunocytochemia vs immunohistochemia
Immunocytochemia (ICC) i immunohistochemia (IHC) to dwie szeroko stosowane techniki w diagnostyce molekularnej, które identyfikują i potwierdzają występowanie zarówno chorób niezakaźnych, jak i chorób zakaźnych w oparciu o markery molekularne obecne na komórkach. Kluczową różnicą w immunocytochemii i immunohistochemii jest cząsteczka stosowana jako procedura analityczna w tych technikach. W ICC stosuje się przeciwciała pierwszorzędowe i drugorzędowe sprzężone z markerami, takimi jak fluorescencja, natomiast do oznaczeń diagnostycznych stosuje się przeciwciała IHC, monoklonalne i poliklonalne.
Co to jest immunocytochemia (ICC)?
ICC wykorzystuje pierwotne i wtórne przeciwciała związane z markerami, takimi jak markery fluorescencyjne lub enzymy, i jest potężną metodą wykrywania antygenów obecnych na komórkach docelowych, które mogą być zakaźnymi cząstkami komórkowymi lub nowotworowymi komórkami nowotworowymi. Do immunocytochemii wymagane są trzy rodzaje kontroli.
- Pierwotne przeciwciało – kontrola, która pokazuje specyficzność wiązania pierwszorzędowego przeciwciała z antygenem
- Przeciwciało drugorzędowe – kontrola, która pokazuje, że znacznik jest specyficzny dla przeciwciała pierwszorzędowego
- Kontrola etykiet – pokaż, że etykietowanie jest wynikiem dodanej etykiety, a nie wynikiem etykietowania endogennego.
Rysunek 01: Immunocytochemia znakuje poszczególne białka w komórkach (tutaj, hydroksylaza tyrozynowa w aksonach współczulnych neuronów autonomicznych jest pokazana na zielono).
Pierwsza kontrola przeciwciał jest specyficzna dla każdego nowego przeciwciała i nie może być powtórzona dla każdego eksperymentu. Drugorzędowa kontrola przeciwciała jest zaprojektowana w oparciu o przeciwciało pierwszorzędowe wykorzystywane w eksperymencie i jest dołączona do każdego eksperymentu. Kontrola etykietowania jest uwzględniana w przypadku zmiany warunków procedury, zmiany próbki lub w przypadku znalezienia nieoczekiwanego etykietowania.
Dwa główne zastosowania ICC to test radioimmunologiczny (RIA) i test immunoenzymatyczny (ELISA). Najczęściej stosowanym przeciwciałem jest immunoglobulina G.
Co to jest immunohistochemia (IHC)?
W immunohistochemii próbka źródłowa zawiera przeciwciała monoklonalne i poliklonalne w celu określenia obecności antygenów w obcych komórkach. Ta technika opiera się na specyficznej reakcji wiązania antygen-przeciwciało. Przeciwciała stosowane w detekcji mogą być znakowane różnymi markerami; mogą to być markery fluorescencyjne, markery radioznakowane lub markery chemiczne. Poprzez ułatwienie wiązania in vitro między antygenem a docelowym przeciwciałem, można określić obecność lub brak określonego białka w komórce.
Rysunek 02: Barwienie immunohistochemiczne normalnej nerki za pomocą CD10
Obecnie naukowcy są zaangażowani w opracowywanie przeciwciał docelowych dla określonych antygenów obecnych w komórkach, które mogą rozwinąć się jako złośliwe komórki nowotworowe lub antygeny obecne w czynnikach zakaźnych, takich jak HIV.
Jakie są podobieństwa między immunocytochemią a immunohistochemią?
- Reakcje są bardzo specyficzne i dokładne w ICC i IHC.
- Zastosowania ICC i IHC obejmują diagnostykę nowotworów i chorób zakaźnych.
- Warunki sterylne powinny być utrzymywane w obu warunkach i powinny być przeprowadzane in vitro
- Obie techniki zapewniają powtarzalne wyniki.
- Oba są szybkie.
- Oznakowanie radiowe, techniki fluorescencyjne są stosowane jako metody wykrywania zarówno w ICC, jak i IHC.
- Oba są oparte na parowaniu antygen-przeciwciało.
Jaka jest różnica między immunocytochemią a immunohistochemią?
Immunocytochemia (ICC) a immunohistochemia (IHC) |
|
| ICC wykorzystuje pierwszorzędowe i drugorzędowe markery związane z przeciwciałami, takie jak markery fluorescencyjne lub enzymy, i jest potężną metodą wykrywania antygenów obecnych na komórkach docelowych. | IHC to metoda wykorzystująca przeciwciała monoklonalne i poliklonalne do określenia obecności antygenów, które są specjalnymi markerami białkowymi umieszczonymi na powierzchni komórek. |
| Przykładowe źródło | |
| Próbki pochodzące z tkanek, które zostały przetworzone histologicznie na cienkie skrawki są używane w ICC. | IHC wykorzystuje próbki składające się z komórek wyhodowanych w pojedynczej warstwie lub komórek w zawiesinie, które są umieszczane na szkiełku. |
| Przetwarzanie próbki | |
| W ICC komórki powinny być przepuszczalne, aby ułatwić przenikanie przeciwciał do celów wewnątrzkomórkowych. | W IHC komórki są utrwalane w formalinie, zatapiane w parafinie przed barwieniem. |
Podsumowanie – Immunocytochemia kontra immunohistochemia
Diagnostyka molekularna służy do identyfikacji i potwierdzania występowania zarówno chorób niezakaźnych, jak i chorób zakaźnych w oparciu o markery molekularne obecne na komórkach. Markery molekularne mogą być białkami lub sekwencjami DNA lub RNA; rozwój technologii, takich jak ICC i IHC, utorował naukowcom drogę do identyfikacji choroby i jej przyczyny na wczesnym etapie. Zarówno ICC, jak i IHC zależą od specyficznych reakcji między przeciwciałem a antygenem, chociaż źródło próbki. Główną różnicą między immunocytochemią a immunohistochemią jest przetwarzanie próbek w ramach tych dwóch procedur.
Pobierz wersję PDF immunocytochemii a immunohistochemia
Możesz pobrać wersję PDF tego artykułu i używać jej do celów offline zgodnie z notatką cytowania. Proszę pobrać wersję PDF tutaj Różnica między immunocytochemią a immunohistochemią.
