Kluczowa różnica między wektorem wahadłowym a wektorem ekspresyjnym polega na tym, że wektor wahadłowy jest zwykle plazmidem, który nie jest przeznaczony do badań nad ekspresją genów w komórkach, podczas gdy wektor ekspresyjny jest zwykle plazmidem lub wirusem zaprojektowanym do badań nad ekspresją genów w komórkach. komórki.
W biologii molekularnej wektor to cząsteczka DNA wykorzystywana jako nośnik do przenoszenia obcego materiału genetycznego do innej komórki, gdzie może być replikowany lub wyrażany. Wektor kontaktujący się z obcym materiałem genetycznym jest ogólnie nazywany rekombinowaną cząsteczką DNA. Cztery główne typy wektorów to plazmidy, wektory wirusowe, kosmidy i sztuczne chromosomy. Wśród nich najczęściej stosowanymi wektorami są plazmidy. Wektor wahadłowy i wektor ekspresyjny to dwa rodzaje wektorów stosowanych w biologii molekularnej.
Co to jest wektor wahadłowy?
Wektor wahadłowy to wektor zaprojektowany do rozmnażania w dwóch różnych gatunkach żywicieli. Dlatego obcy DNA wprowadzony do wektora wahadłowego można testować lub manipulować w dwóch różnych typach komórek. Zwykle wektor wahadłowy ma dwa miejsca rozpoczęcia replikacji, z których każdy jest specyficzny dla gospodarza. Ponieważ wektory wahadłowe replikują się w dwóch różnych gospodarzach, znane są również jako wektory dwufunkcyjne. Jednym z popularnych wektorów wahadłowych jest wektor wahadłowy drożdży. Ponadto prawie wszystkie powszechnie stosowane wektory Saccharomyces cerevisiae są wektorami wahadłowymi. Na przykład, wektor wahadłowy drożdży zawiera składniki, które umożliwiają replikację i selekcję zarówno w komórkach drożdży, jak i komórkach E. coli. Składniki E. coli drożdżowego wektora wahadłowego są miejscem inicjacji replikacji i markerem selekcyjnym (np.antybiotykooporność, beta-laktamaza). Składniki drożdży drożdżowego wektora wahadłowego to sekwencja autonomicznie replikująca się (ARS), centromer drożdżowy (CEN) i selektywny marker drożdżowy (np. URA3-gen, który koduje enzym do syntezy uracylu)
Co to jest wektor wyrażeń?
Wektor ekspresyjny jest zwykle plazmidem lub wirusem skonstruowanym do ekspresji genów w komórkach. Ten wektor służy do wprowadzenia określonego genu do komórki docelowej. Ten wektor może przejąć kontrolę nad mechanizmem syntezy białek w komórce, aby wytworzyć białko kodowane przez określony gen. Gdy wektor ekspresyjny znajdzie się w komórce, białko kodowane przez obcy gen jest produkowane przy użyciu translacyjnych kompleksów rybosomalnych maszynerii komórkowej.
Rysunek 01: Wektor wyrażenia
Wektor ekspresyjny jest skonstruowany tak, aby zawierał sekwencje regulatorowe, które działają jako regiony wzmacniające i promotorowe, co prowadzi do wydajnej transkrypcji obcego genu. Stąd znaczna ilość stabilnego informacyjnego RNA (mRNA) może być później tłumaczona na określone białka. Ekspresja białka przy użyciu wektora ekspresyjnego może być ściśle kontrolowana. Białko jest produkowane w znacznych ilościach, gdy jest to konieczne, dzięki zastosowaniu induktora. Jednak w niektórych systemach białko może być wyrażane konstytutywnie. Popularnym przykładem wektora ekspresyjnego jest ssaczy wektor pCI.
Jakie są podobieństwa między wektorem wahadłowym a wektorem ekspresyjnym?
- Wektor wahadłowy i wektor ekspresyjny to dwa typy wektorów stosowane w biologii molekularnej.
- Oba typy wektorów mogą być plazmidami.
- Te typy wektorów mają początek replikacji.
- Oba typy wektorów mają miejsca klonowania.
- Te wektory mają markery selekcyjne (oporność na antybiotyki).
Jaka jest różnica między wektorem wahadłowym a wektorem ekspresyjnym?
Wektor wahadłowy jest zwykle plazmidem, który nie jest przeznaczony do badania ekspresji genów w komórkach, podczas gdy wektor ekspresyjny jest zwykle plazmidem lub wirusem przeznaczonym do badania ekspresji genów w komórkach. Jest to zatem kluczowa różnica między wektorem wahadłowym a wektorem ekspresyjnym. Ponadto wektor wahadłowy nie wymaga sekwencji regulatorowych, takich jak silny promotor, wzmacniacz, induktor i przenośna sekwencja inicjacji translacji (PTIS) oraz silny terminator. Z drugiej strony wektor ekspresyjny wymaga sekwencji regulatorowych, takich jak silny promotor, wzmacniacz, induktor i przenośna sekwencja inicjacji translacji (PTIS) oraz silny terminator.
Poniższa infografika przedstawia różnice między wektorem wahadłowym a wektorem ekspresyjnym w formie tabelarycznej do bezpośredniego porównania.
Podsumowanie – wektor wahadłowy a wektor ekspresyjny
Wektor wahadłowy i wektor ekspresyjny to dwa rodzaje wektorów używanych w eksperymentach biologii molekularnej. Wektor wahadłowy jest zwykle plazmidem, który nie jest przeznaczony do badań ekspresji genów w komórkach, podczas gdy wektor ekspresyjny jest zwykle plazmidem lub wirusem przeznaczonym do badań ekspresji genów w komórkach. Jest to więc kluczowa różnica między wektorem wahadłowym a wektorem ekspresyjnym.
