Kluczowa różnica między HPLC a UPLC polega na tym, że HPLC pozwala na analizę cząstek o wielkości około 5 mikrometrów, podczas gdy UPLC pozwala na znacznie mniejsze cząstki o wielkości około 2 mikrometrów.
HPLC i UPLC to techniki chromatografii cieczowej, które są przydatne w rozdzielaniu składników związku. Aby poznać różnicę między HPLC a UPLC, najpierw musimy wiedzieć, czym jest HPLC. Dzieje się tak, ponieważ UPLC jest specjalną wersją HPLC i możemy ją łatwo zrozumieć, jeśli wiemy, czym jest HPLC.
Co to jest HPLC?
Termin HPLC oznacza wysokosprawną chromatografię cieczową. Jest to technika, której możemy użyć do oddzielenia różnych składników związku. Jest to również najszerzej stosowana technika identyfikacji, ilościowego oznaczania i oddzielania składników mieszaniny. Poza tym technika ta wykorzystuje wysokie ciśnienie do przepchnięcia rozpuszczalników przez kolumnę. Ponadto główne zastosowania HPLC obejmują biochemię do analizy składników związku. Jest to idealny sposób na separację i identyfikację aminokwasów, kwasów nukleinowych, białek, węglowodorów, pestycydów, węglowodanów, antybiotyków, sterydów i niezliczonych innych substancji nieorganicznych.
Rysunek 01: System HPLC w laboratorium
W skrócie, sposób działania techniki HPLC jest następujący. Po pierwsze należy wprowadzić próbkę do strumienia fazy ruchomej w dyskretnych niewielkich ilościach za pomocą pompy. Ciśnienie pompy powinno być utrzymywane na poziomie 40 MPa. Następnie ten strumień fazy ruchomej przesącza się przez kolumnę HPLC. Przez kolumnę przechodzą również składniki próbki. Jednak ich prędkości poruszania się różnią się od siebie. Ta różnica wynika z różnicy oddziaływań między składnikami próbki a adsorbentem wewnątrz kolumny. Nazywamy ten adsorbent jako fazą stacjonarną, ponieważ znajduje się wewnątrz kolumny (nie porusza się). Po drugie, na końcu kolumny możemy pobrać próbkę, która eluuje się z kolumny. Tam możemy określić różnice w czasach retencji dla każdego składnika w próbce.
Co to jest UPLC?
Termin UPLC oznacza ultra wysokowydajną chromatografię cieczową. Jest to odmiana HPLC, ale sposób działania jest taki sam. Jednak w przeciwieństwie do HPLC, ta metoda umożliwia analizę bardzo małych cząstek, takich jak małe cząstki o wielkości 2 mikrometrów.
Rysunek 02: Urządzenie UPLC
Ponadto zapewnia szybszą analizę. W tej technice do wprowadzenia próbki do kolumny używamy ciśnienia pompy 100 MPa. Stąd to wysokie ciśnienie potwierdza, że cała próbka jest wprowadzana do kolumny. Jest to zatem bardzo wydajne w porównaniu do HPLC.
Jaka jest różnica między HPLC a UPLC?
Termin HPLC oznacza wysokosprawną chromatografię cieczową, podczas gdy termin UPLC oznacza ultra wysokosprawną chromatografię cieczową. Dlatego technika UPLC jest rozwiniętą wersją HPLC. Tak więc sposób działania jest taki sam dla obu technik. Jednak UPLC jest bardziej wydajny w porównaniu do HPLC, ponieważ wykorzystuje wysokie ciśnienie pompy; ciśnienie pompy dla HPLC wynosi 40 MPa, a dla UPLC 100 MPa. Dlatego jest to różnica między HPLC a UPLC. Przede wszystkim kluczowa różnica między HPLC a UPLC polega na tym, że HPLC pozwala na analizę cząstek o wielkości około 5 mikrometrów, podczas gdy UPLC pozwala na znacznie mniejsze cząstki o wielkości około 2 mikrometrów.
Podsumowanie – HPLC vs UPLC
UPLC to forma HPLC. Tak więc metody działania są takie same. Ale możemy znaleźć pewne ulepszone funkcje w UPLC w porównaniu do HPLC. Dlatego istnieje pewna różnica między HPLC a UPLC. Jednak kluczowa różnica między HPLC a UPLC polega na tym, że HPLC pozwala na analizę cząstek o wielkości około 5 mikrometrów, podczas gdy UPLC pozwala na znacznie mniejsze cząstki o wielkości około 2 mikrometrów.
