Kluczowa różnica między całkowitą liczbą komórek a liczbą komórek żywych polega na tym, że całkowita liczba komórek szacuje wszystkie komórki, w tym zarówno żywe, jak i martwe komórki drobnoustrojów w próbce, podczas gdy liczba żywych komórek szacuje tylko żywe komórki drobnoustrojów w próbce.
Zliczanie liczby organizmów w populacji jest uważane za niezbędne w przypadku większości prac eksperymentalnych. Dlatego staramy się analizować liczebność drobnoustrojów w próbce metodami bezpośrednimi i pośrednimi. Pomiary bezpośrednie obejmują metody, które bezpośrednio liczą liczbę komórek. Pomiary pośrednie obejmują pomiar niektórych parametrów, które mogą być powiązane z liczbą komórek, takich jak gęstość komórek, sucha masa itp. Niektóre metody określają ilościowo tylko żywe komórki drobnoustrojów w próbce. Jedną z takich metod jest liczba żywych komórek. Bezpośrednie zliczenia mikroskopowe określają ilościowo wszystkie komórki w znanej objętości pożywki/próbki za pomocą mikroskopu. Dlatego liczy zarówno żywe, jak i martwe komórki. Jest to rodzaj całkowitej liczby komórek.
Co to jest całkowita liczba komórek?
Całkowita liczba komórek to metoda polegająca na zliczeniu wszystkich komórek w znanej objętości podłoża/próbki przy użyciu mikroskopu i komory zliczającej (hemocytometru). W przeciwieństwie do liczby żywych, liczone są zarówno żywe, jak i martwe komórki. W związku z tym jest to całkowita liczba, chyba że podczas obserwacji zostanie zastosowany barwnik na żywotność. W mikroskopii komórki są obserwowane bezpośrednio pod mikroskopem i liczone. Wykorzystuje zawiesinę komórkową składającą się z komórek drobnoustrojów. Dla ułatwienia liczenia i dokładnych pomiarów można wykonać rozcieńczenie próbki. W bardzo wysokich/niskich stężeniach komórek uzyskanie całkowitej liczby komórek za pomocą mikroskopu jest trudnym zadaniem.
Rysunek 01: Komora zliczeniowa – hemocytometr
Komory zliczające są łatwe, niedrogie i szybkie w pomiarze całkowitej liczby komórek. Co najważniejsze, komory do zliczania są przydatne do zliczania zarówno eukariontów, jak i prokariotów. Liczymy komórki w wybranych kwadratach o znanej objętości, aby określić ilościowo całkowitą liczbę komórek.
Co to jest liczba żywych komórek?
Liczenie żywych komórek to metoda liczenia żywych komórek drobnoustrojów w próbce. Liczy tylko żywe komórki w próbce. Zliczanie żywych płytek, filtracja membranowa i najbardziej prawdopodobna liczba to kilka technik zliczania żywych komórek. Te podejścia są oparte na wzroście. Metoda liczenia żywych płytek jest potężną metodą stosowaną w wielu dziedzinach mikrobiologicznych, w tym w mikrobiologii żywności i mleczarni, mikrobiologii medycznej, mikrobiologii środowiskowej, genetyce drobnoustrojów, rozwoju pożywek wzrostowych i biotechnologii.
Najczęstszym sposobem liczenia żywych bakterii jest użycie próbki zdolnej do tworzenia kolonii na podłożu agarowym. Istnieją dwa główne sposoby wykonania liczenia talerzy: technika talerza rozprowadzanego i technika talerza lanego. Znaną objętość próbki można rozprowadzić na powierzchni płytki agarowej lub zmieszać z agarem. Płytkę następnie inkubuje się i zlicza się powstające kolonie. Liczba kolonii jest powiązana z liczbą mikroorganizmów w oryginalnej próbce. Liczba żywych komórek mierzy tylko te komórki, które są żywe i rosną.
Rysunek 02: Liczba żywych płyt
Liczba najbardziej prawdopodobna (MPN) jest alternatywą dla metod liczenia płytek do szacowania gęstości populacji żywych komórek. Liczy organizmy rosnące w kulturze płynnej, a zatem jest głównie techniką bakteriologiczną. Jest szczególnie przydatny w przypadku niskich stężeń organizmów m.in. mleko, woda pitna.
Technika filtracji membranowej jest bardziej odpowiednia, gdy drobnoustroje są bardzo rozcieńczone, tak jak w miejskiej sieci wodociągowej. Robi się to po prostu przepuszczając znaną objętość płynu przez filtr i inkubując go na pożywce. Zliczane są kolonie, które rozwijają się na filtrze, a bakterie na mililitr próbki są obliczane.
Jakie są podobieństwa między całkowitą liczbą komórek a liczbą żywych komórek?
- Całkowita liczba komórek i liczba żywych komórek to dwa rodzaje technik mikrobiologicznych, które określają ilość komórek.
- Są one powszechnie stosowane w laboratoriach mikrobiologicznych.
Jaka jest różnica między całkowitą liczbą komórek a liczbą żywych komórek?
Całkowita liczba komórek obejmuje wszystkie żywe i martwe komórki drobnoustrojów w próbce. W przeciwieństwie do tego, liczba żywych komórek zlicza tylko żywe komórki w próbce. Jest to więc kluczowa różnica między całkowitą liczbą komórek a liczbą żywych komórek. Całkowita liczba komórek jest niezależna od wzrostu kolonii na płytkach agarowych, podczas gdy liczba żywych komórek jest techniką opartą na wzroście i zależy od wzrostu kolonii drobnoustrojów na płytkach agarowych.
Poniższa grafika informacyjna podsumowuje różnicę między całkowitą liczbą komórek a liczbą żywych komórek.
Podsumowanie – Całkowita liczba komórek a liczba żywych komórek
Całkowita liczba komórek obejmuje zarówno żywe, jak i martwe komórki drobnoustrojów, podczas gdy liczba żywych komórek obejmuje tylko żywe komórki. Jest to zatem kluczowa różnica między całkowitą liczbą komórek a liczbą żywych komórek. Ponadto, liczba żywych komórek jest techniką opartą na wzroście, w przeciwieństwie do całkowitej liczby komórek. Ponadto wymaga inkubacji płytek do momentu uzyskania widocznych kolonii. Liczba żywych płytek, MPN i filtracja membranowa to tylko kilka technik liczenia żywych komórek, podczas gdy bezpośrednia mikroskopia i użycie hemocytometru to dwie techniki całkowitej liczby komórek.
