Eluent kontra Eluate
Chromatografia to szeroko stosowana metoda oddzielania składników z mieszaniny. Ta metoda wykorzystuje fazę stacjonarną i fazę ruchomą. Składniki mieszaniny są przenoszone przez fazę stacjonarną przez przepływ fazy ruchomej. W chromatografii rozdziały opierają się na różnicach w szybkości migracji między składnikami fazy ruchomej. W upakowanej kolumnie składniki są rozdzielane przez elucję. Kolumna składa się z wąskiej rurki wypełnionej ciałem stałym utrzymującym fazę stacjonarną. Samo ciało stałe może być fazą stacjonarną. Czasami stosuje się obojętne ciało stałe, które utrzymuje fazę stacjonarną. Fazę ruchomą można wprowadzić od góry rury, a następnie zajmie ona przestrzenie pomiędzy fazami stacjonarnymi. Początkowo do kolumny wprowadzana jest mieszanina roztworu zawierająca składniki, które wymagają rozpuszczenia. Do ładowania można wykorzystać część fazy ruchomej. Zgodnie z polaryzacją składniki mieszaniny będą rozdzielone między fazę stacjonarną a fazę ruchomą. Następnie następuje elucja przez przepychanie składników próbki przez kolumnę przez ciągłe dodawanie świeżej fazy ruchomej. Od czasu do czasu składniki wychodzące z kolumny można było zebrać do probówek. Jako fazę ruchomą możemy stosować mieszaniny rozpuszczalników w zależności od składników, które musimy oddzielić. Stosując serię rozpuszczalników zgodnie z gradientem polarności, możemy osobno rozdzielić wszystkie składniki. Oprócz opisanej powyżej metody chromatografii cieczowej możemy również zastosować chromatografię gazową do oddzielenia próbek gazowych. W tym przypadku fazą ruchomą jest gaz, znany jako gaz nośny.
Eluent
Eluent to część fazy ruchomej, która przenosi ze sobą składniki próbki. W chromatografii cieczowej eluent jest rozpuszczalnikiem stosowanym jako faza ruchoma. W chromatografii gazowej jest to gaz nośny. Zwykle gazem eluentu w chromatografii gazowej jest gaz obojętny/niereaktywny, taki jak hel lub azot. Eluent przesuwa się w dół kolumny zawierającej próbkę. Ponieważ eluent i faza stacjonarna mają przeciwne bieguny, eluent nie oddziałuje z fazą stacjonarną. Dlatego jego ruch jest niezależny. Jeśli składniki w próbce mają podobną polarność do eluentu, mają do siebie wysokie powinowactwo. Ułatwia to ruch próbki.
Eluate
Eluate wychodzi z kolumny. Zwykle zawiera fazę ruchomą i anality z próbki, którą chcieliśmy oddzielić. Zmieniając rodzaj dodawanego eluentu otrzymujemy eluat zawierający różne składniki próbki. Następnie usuwając fazę ruchomą (poprzez odparowanie) możemy wyizolować poszczególne anality znajdujące się w próbce.
Jaka jest różnica między Eluentem a Eluate?
• Eluent to część fazy ruchomej, która przenosi ze sobą składniki próbki. Eluat to połączenie fazy ruchomej i analitów. Dlatego interesuje nas eluat.
• Dodajemy eluent do kolumny, a eluat jest tym, co wychodzi z kolumny.
• Możemy określić i kontrolować, co dodajemy jako eluent, ale charakter eluatu zależy od eluentu. Nie możemy w 100% kontrolować jego składników.
