Kluczowa różnica – HPLC vs LCMS
Przyjrzyjmy się najpierw znaczeniu HPLC i LCMS przed analizą różnicy między HPLC a LCMS. Chromatografia to technika rozdzielania w analizie chemicznej, w której składniki próbki są rozdzielane podczas przechodzenia przez medium chromatograficzne. Obejmuje również interakcję z próbką, fazą stacjonarną i fazą ruchomą. HPLC oznacza wysokosprawną chromatografię cieczową i jest stosowana jako metoda chromatografii cieczowej w chemii analitycznej. Połączenie chromatografii cieczowej i spektroskopii mas (LCMS) zostało opracowane do ilościowej analizy wybranych biomolekuł i jest to wysoce czuła, dokładna i specyficzna procedura testowa w porównaniu do HPLC. To jest kluczowa różnica między HPLC a LCMC. Ten artykuł wprowadzi Cię do HPLC i LCMC, które zajmują się analizą chemiczną i omówią różnice między HPLC a LCMS.
Co to jest HPLC?
Wysokosprawna chromatografia cieczowa (HPLC) to popularna technika separacji w chemii analitycznej. Stosowany jest głównie do oddzielenia składników, identyfikacji i ilościowego określenia każdego składnika w mieszaninie. Wcześniej metoda ta była znana jako wysokociśnieniowa chromatografia cieczowa, ponieważ polegała na pompowaniu ciekłego rozpuszczalnika pod ciśnieniem zawierającego mieszaninę próbki przez kolumnę wypełnioną stałym materiałem adsorbującym. Każdy składnik w mieszaninie próbki inaczej oddziałuje ze stałym materiałem adsorbującym, co skutkuje różnymi szybkościami przepływu dla różnych składników. Może to prowadzić do rozdzielenia składników, gdy wypływają z kolumny HPLC.
HPLC był używany do różnych zastosowań, takich jak analiza poziomu witaminy D we krwi, nielegalne zażywanie narkotyków przez sportowców poprzez wykrywanie pozostałości narkotyków w ich moczu, sortowanie składników złożonej próbki biologicznej do celów badawczych i analitycznych i produkcja farmaceutyków.
Co to jest LCMS?
Chromatografia cieczowa – spektrometria mas (LCMS) to technika analityczna, która łączy fizyczne możliwości rozdzielania chromatografii cieczowej z możliwościami analizy masowej spektrometrii mas (MS). Chromatografia cieczowa jest techniką rozdzielania, a spektrometria masowa służy do analizy stosunku masy do ładunku naładowanych cząstek. Fizyczną separację zwykle uzyskuje się za pomocą HPLC i alternatywnie LCMS, znanej również jako HPLC-MS. LCMS jest dominującą techniką analityczną, która ma bardzo wysoką dokładność, czułość i specyficzność w porównaniu do HPLC. W związku z tym jest przydatny w wielu zastosowaniach, takich jak cele badawcze, analiza leków, analiza żywności itp. LCMS służy głównie do oddzielania, wykrywania, identyfikacji i ilościowego określania właściwości biochemicznych konkretnej próbki w obecności złożonych mieszanin chemicznych.
Jaka jest różnica między HPLC a LCMC?
Skrót i definicja HPLC i LCMC
HPLC: HPLC oznacza wysokosprawną chromatografię cieczową. Jest to technika rozdzielania stosowana głównie do oddzielenia składników, identyfikacji i ilościowego określenia każdego składnika w mieszaninie.
LCMS: LCMS oznacza chromatografię cieczową i spektrometrię mas. Jest to technika analityczna, która łączy fizyczne zdolności rozdzielania chromatografii cieczowej z możliwościami analizy masowej spektrometrii masowej (MS).
Charakterystyka HPLC i LCMC
Klasyfikacja
HPLC: To jest tylko metoda chromatografii cieczowej.
LCMS: Jest to połączenie metody chromatografii cieczowej i metody spektrometrii masowej.
Wydajność
HPLC: W porównaniu z LCMS, analiza HPLC jest mniej wydajna i wolniejsza.
LCMS: W porównaniu do HPLC analiza LCMS jest wydajna i szybsza.
Czułość
HPLC: W porównaniu z LCMS, analiza HPLC jest mniej czuła.
LCMS: W porównaniu do HPLC, analiza LCMS jest bardziej czuła.
Specyfika
HPLC: W porównaniu z LCMS, analiza HPLC jest mniej specyficzna.
LCMS: W porównaniu z HPLC, analiza LCMS jest bardziej szczegółowa.
Dokładność
HPLC: HPLC daje mniej dokładne wyniki niż LCMS do oznaczania niektórych chemikaliów.
LCMS: LCMS daje dokładniejsze wyniki niż HPLC do oznaczania niektórych substancji chemicznych.
Komponent
HPLC: HPLC może być uważana za składnik LCMS.
LCMS: LCMS nie może być uważany za składnik HPLC.
Źródło jonów
HPLC: Źródło jonów nie istnieje w aparacie HPLC.
LCMS: Źródło jonów jest obecne w instrumencie LCMS.
Aplikacje
HPLC: Jony, polimery, cząsteczki organiczne i biomolekuły można analizować za pomocą HPLC.
LCMS: Można analizować cząsteczki organiczne i biomolekuły. W przeciwieństwie do HPLC, LCMS może być używany do badania niecałkowicie rozdzielonych mieszanin.
Operacja
HPLC: Schemat przyrządu HPLC jest przedstawiony na rysunku 1 i zwykle zawiera autosampler, pompy i detektor. Próbnik wprowadza mieszaninę próbki do fazy ruchomej (pod ciśnieniem mieszanina rozpuszczalników, takich jak woda, acetonitryl i/lub metanol), która przenosi ją do kolumny. Pompy dostarczają przez kolumnę żądany przepływ i skład fazy ruchomej. Kolumna jest wypełniona adsorbentem, który jest ziarnistą cząstką stałą, taką jak krzemionka lub polimery. Detektor wytwarza sygnał proporcjonalny do ilości składników próbki w kolumnie, co pozwala na wymierną analizę wybranych składników próbki. Przyrząd HPLC jest kontrolowany, a analizę danych zapewnia cyfrowy mikroprocesor i oprogramowanie użytkownika.
Rysunek 1: Schemat przyrządu HPLC
LCMS: Schemat urządzenia LCMS przedstawiono na figurze 2. Ekstrakt próbki wstawia się do kolumny składającej się z HPLC. Ta kolumna zawiera próbki metabolitów w oparciu o cechy fizyczne, a różne metabolity przepływają do spektrometru mas w różnych odstępach czasu. Spektroskopia mas służy do oceny mas cząstek, określania pierwiastkowego uporządkowania molekuły oraz wyjaśniania struktur molekuł. Jednak próbka powinna zostać zjonizowana, aby wygenerować naładowane cząsteczki w celu określenia ich stosunku masy do ładunku. Dlatego zamiast przyrządów HPLC, LCMS składa się z dodatkowych trzech modułów, takich jak źródło żelaza, analizator masy i detektor. Źródło jonów może przekształcić próbkę fazy gazowej w jony, a analizator masy grupujący jony według ich mas za pomocą pól elektromagnetycznych. Wreszcie detektor określa ilościowo wartości i dostarcza dane dotyczące każdego jonu obecnego w próbce. Technikę LCMS można stosować zarówno do zastosowań jakościowych, jak i ilościowych.
Rysunek 2: Schemat przyrządu LCMS
Podsumowując, HPLC to metoda chromatografii cieczowej, podczas gdy LCMS to połączenie chromatografii cieczowej i spektrometrii masowej. Obie te techniki analizy mają różne cechy, ale można je stosować do identyfikacji i ilościowego określania składu żywności, farmaceutyków i innych bioaktywnych cząsteczek.
